発現誘導型遺伝子改変マウスと新型超解像顕微鏡による内耳不動毛成立過程の解明

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本研究の目的は、「発現誘導型遺伝子改変マウス」と「新しい超解像顕微鏡IRIS」を組み合わせ、内耳不動毛の構築過程や損傷・修復過程を明らかにすることであった。本研究課題は、申請者のNational Institutes of Healthへの留学に伴って留学先研究室にて行うこととなったため、発展的に廃止となっている。「新しい超解像顕微鏡IRIS」は、抗体を用いた結合解離プローブの単離に成功しており、３種類のタグ、２種類のタンパク抗原に対するプローブを単離している。培養細胞を用いてその性能をチェックしたところ、既存の超解像顕微鏡と遜色ない解像度が得られたほか、プローブを洗い流すことでシーケンシャルな超解像撮影が可能であることも確認できた。現在市販されている波長の違いを利用した免疫染色の限界が７色であること、また既存の超解像顕微鏡では３－４色が限界であることを考えると、これらの結果は大きなアドバンテージである。また、組織標本における内在性抗原の検出にも成功しており、上記内容は近日中に論文投稿予定である。一方、「発現誘導型遺伝子改変マウス」については、マウスの設計と培養細胞を用いた発現誘導の確認までは完了しているが、実際の作成は留学先において行うこととなった。留学先のNIHには、マウスの作成ユニット、超解像顕微鏡を専門とするユニット等があり、すでにディスカッションを開始している。本研究計画をより実現可能性の高い形で行うべく、設計の改良、実験計画の更新を行っている。