マクロファージ由来のエクソソームを用いた末梢神経再生研究

使用巨噬细胞来源的外泌体进行周围神经再生研究

• 批准号: 18K16983
• 负责人: 内堀 貴文
• 金额: $ 2.16万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K16983/
• 关键词: エクソソーム; マクロファージ; M１; M２; M1; M2; 神経再生; 骨髄芽球; マクロファージ１; マクロファージ２; 末梢神経再生

本研究の目的は、マクロファージからエクソソームを抽出し、神経障害部位に導入することで、持続的な抗炎症効果や組織修復効果を得ることができ、最終的には機能的なレベルでの神経回復が可能であることの立証を目標とした。マクロファージからエクソソームを抽出し、特性を評価した。ラットより採血し血球成分を分画した後に、CD14+の単球系 細胞を抽出し、LPS、IL-4を添加することでM1とM2への分化誘導を行った。FACSを用いてCCR7+のM1とCD206+のM2を抽出培養し、各々培養上清より0.22μm フィルターで濾過後、100,000g、2時間の超遠心後M1由来のエクソソーム（M1Ex）とM2 由来のエクソソーム（M2Ex）を分離・回収した。M2Exの投与方法は神経障害部位への直接注入とした。タイムポイントとしては、有害事象が起きていないか検討するために2週を1つのタイムポイントとし、神経再生がほぼ完成すると考えられる16及びその半分の8週で評価を行った。しかし神経生理学的検査において、全く差異が出なかった。M1、M2由来のエクソソームは抽出できたと考えるが、分量が少ないためか、神経修復やその他において全く差異が出なかった。そもそも、適正に実験が行われていても差異が出ない可能性もある。最終年度は前の年度までと同様、上記内容を進めていたが、4月末での退職が決まっていたためほとんど研究は進めていない。

The purpose of this study is to extract and introduce the anti-inflammatory effect and tissue repair effect into the damaged parts of the brain, and finally to establish the evidence of the functional recovery of the brain. The best way to do this is to get started. After blood cell analysis, CD14 + cells were extracted, LPS and IL-4 were added, and M1 and M2 differentiation was induced. M1, CD206 and M2 of CCR7 + were extracted and cultured by FACS. After filtration of 0.22μm supernatant, 100,000 g and 2 hours of ultra-telecentricity, M1 and M2 were separated and recovered. The delivery method of M2Ex is direct injection into the damaged parts of the brain. For example, when a harmful event occurs, it is evaluated at 2 weeks, 1 week and 8 weeks after the event, and when the regeneration is completed. The investigation of neurophysiology is very different. M1 and M2 are derived from a variety of factors, such as weight, weight, and mental health. There is a difference between the two. The final year is the same year as the previous year, and the content of the record is advanced. At the end of April, the resignation is decided.