三叉神経（痛覚特異的ニューロン群）のATPを介した炎症性疼痛の解明

阐明三叉神经中 ATP 介导的炎性疼痛（疼痛特异性神经元群）

基本信息

批准号：
18K17179
负责人：
黒田英孝
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kanagawa Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は，三叉神経系におけるATP受容体を介した細胞内・細胞間コミュニケーションの詳細について網羅的に検索することで，炎症性疼痛のメカニズムを解明することである．本研究は昨年度までに，三叉神経節（TG）細胞におけるP2X7受容体／Panx-1チャネル／P2X4受容体を介したautocrine現象の可能性，TG細胞とその近傍する細胞との細胞間相互作用が疼痛メカニズムに寄与する可能性を示唆した．また、血管内皮細胞におけるCカルシトニン受容体様受容体を介したアデニル酸シクラーゼ（AC）の活性化が細胞内cAMPレベルを増加させ、これらがTGニューロンにおける神経原性炎症に関与する可能性を報告した。歯における神経原性炎症は、神経終末から血管内皮細胞や歯髄細胞へと神経ペプチドが放出されることに起因する。そこで、ラット脳微小血管内皮細胞（RBMEC）に対して、mNeon green cAMP sensorを加え，細胞内cAMP濃度を蛍光強度として記録した。ACの活性薬であるForskolin（FSK）を単独投与すると、RBMECの細胞内cAMPレベルは一過性に増加した。Phosphodiesterase阻害薬であるIBMXを同時投与するとFSK誘発性細胞内cAMPレベルは有意に増加した。Gsタンパク質共役型受容体アゴニストである神経ペプチドをRBMECに投与すると、細胞内cAMPレベルは増加した。その増加はAC阻害薬であるSQ22536で有意に抑制された。RBMECはGsタンパク質共役型受容体に免疫陽性であった。TG細胞への直接的な機械的刺激によって、TG細胞からGsタンパク質共役型受容体作動性神経ペプチドが放出される可能性が示唆された。放出されたペプチドはGsシグナル伝達経路を活性化して、軸索反射としての細胞間コミュニケーションを確立する可能性が示唆された。

这项研究将通过全面搜索三叉神经系统中ATP受体的细胞内和细胞间通信的细节来探索炎症性疼痛的机制。截至去年，这项研究表明，三叉神经节神经节（TG）细胞中P2X7/PANX-1通道/P2X4受体介导的自分泌现象的可能性，TG细胞及其周围细胞之间的细胞细胞相互作用的可能性可能会导致疼痛机制。我们还报道说，血管内皮细胞中通过C降钙素受体样受体的腺苷酸环化酶（AC）激活增加了细胞内cAMP水平，这可能与TG神经元中的神经源性炎症有关。牙齿中的神经源性炎症是由神经末端释放到血管内皮细胞和浆细胞中引起的。因此，将颗粒绿营传感器添加到大鼠脑微血管内皮细胞（RBMEC）中，并将细胞内cAMP浓度记录为荧光强度。 AC的活性药物（FSK）的给药瞬时增加了RBMEC的细胞内cAMP水平。磷酸二酶抑制剂IBMX的共同给药显着增加了FSK诱导的细胞内cAMP水平。施用神经肽，一种GS蛋白偶联受体激动剂，增加了细胞内cAMP的水平。 AC抑制剂SQ22536显着抑制了增加的增加。 RBMEC对GS蛋白偶联受体具有免疫阳性。已经提出，TG细胞的直接机械刺激可能会从TG细胞中释放GS蛋白偶联受体I型神经肽。有人提出，释放的肽可以激活GS信号通路并建立细胞间通信作为轴突反射。