Design of extracellular matrices for mRNA delivery to cell sheet tissues

用于将 mRNA 递送至细胞片组织的细胞外基质的设计

• 批准号: 18KK0415
• 负责人: 小林 純
• 金额: $ 9.98万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019 至 2023
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18KK0415/
• 关键词: 細胞シート; mRNA送達; 細胞外マトリックス; リバーストランスフェクション

高度な代謝機能を持つ肝臓や心筋組織を細胞から作るためには、血管等の脈管構造をはじめとする細胞組織の三次元（3D）微細構造の制御が必須である。我々は、メッセンジャーRNA（mRNA）送達により3D組織内部に血管新生因子を発現させ、生体に移植可能な脈管構造をもつ3D肝臓および心筋組織の作製を目指している。そこで本国際共同研究は、細胞シート組織周囲の細胞外マトリックス設計の観点から高効率なmRNA送達手法を達成するために、細胞シート底面の細胞外マトリックスからmRNA送達を行うための培養基材を設計する。当該年度は、2022年11月7日～2023年3月13日の約4ヶ月間、米国ジョージア工科大学Andres J. Garcia教授の研究室に滞在し、共同研究を実施した。具体的には、組み換えタンパク質であるヘパリン結合性フィブロネクチンフラグメント合成のためのプラスミド設計、大腸菌培養、組み換えタンパク質精製を行った。また、移植可能な肝細胞シートを再現性よく作製する手法も併せて確立した。具体的には、拡散距離（具体的には培地の深さ）を短くすることで、気相/培地界面から培養肝細胞への酸素供給を促進し、単層肝細胞シートを形成できることを実証した。

Highly な metabolic function を hold crucial つ liver や heart muscle tissue を か ら as る た め に は, blood vessels, such as vascular structure of の を は じ め と す る tissue の three dimensional (3 d) micro structure の suppression が must で あ る. I 々 は, メ ッ セ ン ジ ャ ー RNA (mRNA) served に よ り に 3 d organization angiogenic factors を 発 now さ せ vascular structure, raw body に transplantation may な を も つ 3 d liver viscera お よ び を refers the heart muscle tissue の cropping し て い る. は そ こ で this international joint research, cell シ ー ト organization weeks 囲 の extracellular マ ト リ ッ ク ス design の 観 point か ら high working rate な mRNA served gimmick を reached す る た め に, cell シ ー ト underside の extracellular マ ト リ ッ ク ス か ら mRNA line served を う た め の cultivation base material を design す る. During the period of ジョ in that year, from November 7, 2022 to March 13, 2023, approximately 4ヶ months, Professor Andres J. Garcia 's <s:1> research laboratory at the ジョ ジョ ジア ジア ジア university of Engineering in the United States was stationed に to jointly study the を implementation た. Specific に は, group み in え タ ン パ ク qualitative で あ る ヘ パ リ ン associativity フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン フ ラ グ メ ン ト synthetic の た め の プ ラ ス ミ ド design change, coliform cultivation, group み え タ ン パ ク line quality refined を っ た. Youdaoplaceholder0, transplantation may な hepatocyte シ また トを トを reproducibility よく fabricating する techniques また and せて establishing た た. Specific に は, company, distance (specific に は petty の deep さ) を short く す る こ と で, 気 phase/petty interface か ら develop hepatocellular へ の acid grain supply を し, 単 layer of liver cells シ ー ト を form で き る こ と を card be し た.

项目成果

Creation of transplantable hepatocyte sheet tissues by using thermoresponsive cell culture surfaces

使用热响应细胞培养表面创建可移植的肝细胞片层组织

• 发表时间: 2020
• 作者: KOBAYASHI Jun;LEE Hyukjin;YAMATO Masayuki;OKANO Teruo
• 通讯作者: OKANO Teruo

Messenger RNA delivery for fabrication of hepatocyte tissues secreting angiogenic factors

信使 RNA 递送用于制造分泌血管生成因子的肝细胞组织

• 发表时间: 2021
• 作者: KOBAYASHI Jun;LEE Hyukjin;YAMATO Masayuki;OKANO Teruo
• 通讯作者: OKANO Teruo

肝組織工学のためのバイオマテリアル

肝组织工程生物材料

• 发表时间: 2020
• 作者: 小林純;LEE Hyukjin;大和雅之;岡野光夫;小林純
• 通讯作者: 小林純

Ex Vivo Gene Delivery for Fabrication of Hepatocyte Sheet Tissues Secreting Angiogenic Factors

用于制造分泌血管生成因子的肝细胞片组织的离体基因传递

• 发表时间: 2022
• 作者: KOBAYASHI Jun;LEE Hyukjin;YAMATO Masayuki;OKANO Teruo
• 通讯作者: OKANO Teruo

ヘパリン修飾温度応答性高分子グラフト表面に結合したヘパリン結合EGF様増殖因子の活性維持

与肝素修饰的温度响应性聚合物移植物表面结合的肝素结合 EGF 样生长因子的活性维持

• 发表时间: 2022
• 作者: 小林純;有坂慶紀;由井伸彦;大和雅之;岡野光夫
• 通讯作者: 岡野光夫