植物免疫応答におけるアクチン機能および細菌性エフェクターＨｏｐＷ１の作用機構解明

阐明植物免疫反应中肌动蛋白功能和细菌效应器HopW1的机制

• 批准号: 17J00236
• 负责人: 貴嶋 紗久
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (2018)University of Tsukuba (2017)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17J00236/
• 关键词: アクチン; アクチンアイソフォーム; 植物免疫; アクチン結合タンパク質; アイソフォーム; 細胞骨格

P. syringae由来のHopWIエフェクターは、アクチンの重合を阻害し、植物の免疫応答を抑制する。このHopWIのアクチンアイソフォームに対する影響を調べた。N. benthamianaの葉を用いた一過的発現系で、アクチンマーカーとHopWIを共発現した結果、アクチン結合ドメインのマーカーと同様にACT7はフィラメントが観察されず、HopWIの重合阻害の影響が見られた。一方、ACT2はHopWIが発現している細胞でもフィラメントが残ったままで、ACT2とACT7でHopWIの影響が異なっていた。次に、P. syringaeに対する病原抵抗性について、act2・act7機能欠損変異株で比較した (筑波大学との共同研究)。その結果、act7の病原抵抗性が野生型やact2よりわずかに上昇していることが明らかとなった。HopWIの影響や、１年目の研究でアクチン結合ドメインの結合がACT2/ACT7で異なっていたことから、他のアクチン結合タンパク質についてアクチンアイソフォームとの局在を調べた。束化タンパク質FIM1やVLN2、重合促進因子AtFH4の結合はアイソフォーム間で違いは見られなかったが、免疫応答への関与が示唆されている脱重合タンパク質ADF4はACT7特異的に結合した。また、興味深いことにアクチン結合ドメインやACT7と共局在しない微小管とACT2の共局在が観察された。1年目に樹立した蛍光タンパク質融合アクチン発現株の観察方法を検討した結果、細胞の化学固定によってフィラメントを観察することに成功し、異なる組織の表皮細胞でアクチン繊維の太さや長さが異なる様子が観察された。根の表皮細胞ではACT2は微小管様の局在を示し、ACT7は束化したフィラメントに取り込まれていた。以上の結果は、アクチンアイソフォームが植物細胞内で異なる機能を担っている可能性を強く示唆する。

P. Syringae comes from "HopWI immunity", "inhibition", "coincidence", "inhibition" and "inhibition". I don't know what to do. I don't know. I don't HopWI. N. The benthamiana system has been used to verify the results of the system and the HopWI system. The results show that the results are the same as those of the ACT7 system. The results show that the HopWI system has the same effect as the HopWI system. On the one hand, ACT2

项目成果

植物細胞内における蛍光タンパク質に直接融合したアクチンフィラメントと微小管の蛍光顕微鏡観察

荧光显微镜观察植物细胞中直接与荧光蛋白融合的肌动蛋白丝和微管

• 发表时间: 2019
• 作者: 貴嶋紗久;光田展隆;上田太郎
• 通讯作者: 上田太郎

シロイヌナズナにおいて13種のミオシンはXIは8種のアクチンと同様の親和性で結合するのか?

在拟南芥中，13 种肌球蛋白和 XI 的结合亲和力是否与 8 种肌动蛋白相同？

• 发表时间: 2018
• 作者: 藤澤 祐希;薩 如拉;諏訪 貴大;貴嶋 紗久;原口 武士;富永 基樹;上田 太郎;伊藤 光二
• 通讯作者: 伊藤 光二

University of Fribourg(スイス)

弗里堡大学（瑞士）

シロイヌナズナvegetativeアクチンアイソフォームACT2/ACT7は植物表皮細胞で異なる局在を示す

拟南芥营养肌动蛋白异构体 ACT2/ACT7 在植物表皮细胞中表现出不同的定位

• 发表时间: 2018
• 作者: 貴嶋紗久;Christopher J. Staiger;加藤薫;伊藤光二;上田太郎
• 通讯作者: 上田太郎

Measurement of enzymatic and motile activities of Arabidopsis myosins by using Arabidopsis actins

使用拟南芥肌动蛋白测量拟南芥肌球蛋白的酶活性和运动活性

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.12.071
• 发表时间: 2018
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun
• 作者: Rula S;Suwa T;Kijima ST;Haraguchi T;Wakatsuki S;Sato N;Duan Z;Tominaga M;Uyeda TQP;and Ito K.
• 通讯作者: and Ito K.