权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

タイトジャンクションの形成機構の解明

阐明紧密连接的形成机制

基本信息

批准号：
17J00211
负责人：
重富健太
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、前年度までに明らかにしたタイトジャンクション領域に多く存在するコレステロールや炭素数２０以上の極長鎖脂肪酸鎖を有するスフィンゴミエリンがタイトジャンクションの形成にどのように関与しているかを調べた。そこで、タイトジャンクションを消失した細胞における脂質の局在や脂質組成を調べることで、タイトジャンクション領域の脂質がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成に至っているのか、または、脂質の集積がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成を誘導しているのか、手がかりを得ようと考えた。タイトジャンクションは複数のClaudinアイソフォームが集積して形成されている。そのため、一つのClaudinアイソフォームを欠損しても、タイトジャンクションの構造は維持されたままである。そこで、すべてのClaudinアイソフォームを欠損した上皮細胞株を樹立することにした。CRISPR-Cas9法を用いた遺伝子編集によって、すべてのClaudinを欠損したClaudin null細胞の樹立に成功している。現在、Claudin null細胞での細胞膜脂質の局在や脂質組成の変化を解析中である。また、前年度までに行っていたアドヘレンスジャンクションの必須構成タンパク質であるα-cateninを欠損したα-catenin KO細胞を利用したタイトジャンクション形成機構の解析に関しても、新たな知見を得ることができた。タイトジャンクションの形成には、アドヘレンスジャンクションの形成が先立って必要である。これまでに、アドヘレンスジャンクションの形成による細胞膜脂質の局在の変化がタイトジャンクションの形成を誘導することを報告してきたが、細胞骨格の配向性等の変化もタイトジャンクションの形成に必要であるという予備的なデータを得つつあるので、その点に関しても検討を進めていきたい。

This year and the previous year, there are many carbon dioxide in the field of carbon dioxide and carbon dioxide that exist in the field of carbon number 20 or more. Extremely long-lasting fatty acid locks The ンクションの forms the にどのように关 and the しているかを动べた.そこで、タイトジャンクションを disappear したcell におけるlipid の in やlipid composition を Adjustment べることで、タイトジャンクション区のlipidがClaudinをassembleさせ、タイトジャンクションの成に to っているのか、または、lipoのassembleがClaudinをassembleさせ, タイトジャンクションの成をinducing しているのか, 手がかりを得ようと考えた.タイトジャンクションは plural のClaudin アイソフォームがassemble して form されている.そのため、一つのClaudinアイソフォームを无码しても、タイトジャンクションのstructural maintenanceされたままである.そこで, すべてのClaudinアイソフォームを无码した epithelial cell line をEstablishment することにした. The CRISPR-Cas9 method has been successful in the establishment of Claudin null cells and the establishment of Claudin null cells. Currently, Claudin null cells are analyzing the structure of cell membrane lipids and changing their lipid composition.また、The previous year's までに行っていたアドヘレンスジャンクションの must constitute the タンパクquality であるα-cateninをdeficiency したα-catenin KO cells are analyzed using the analysis of the formation mechanism of the KO cells and the new analysis of the new knowledge.タイトジャンクションの forming には, アドヘレンスジャンクションの forming がFirst Establishment って Required である.これまでに、アドヘレンスジャンクションのによるThe localization of cell membrane lipids変化がタイトジャンクションの成をinducing することをreport してきたが, cells It is necessary to change the orientation of the bone structure and other factors to form the structure. Prepared なデータを得つつあるので, そのPoint に关しても検question を入めていきたい.