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タイトジャンクションの形成機構の解明

阐明紧密连接的形成机制

基本信息

批准号：
17J00211
负责人：
重富健太
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、前年度までに明らかにしたタイトジャンクション領域に多く存在するコレステロールや炭素数２０以上の極長鎖脂肪酸鎖を有するスフィンゴミエリンがタイトジャンクションの形成にどのように関与しているかを調べた。そこで、タイトジャンクションを消失した細胞における脂質の局在や脂質組成を調べることで、タイトジャンクション領域の脂質がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成に至っているのか、または、脂質の集積がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成を誘導しているのか、手がかりを得ようと考えた。タイトジャンクションは複数のClaudinアイソフォームが集積して形成されている。そのため、一つのClaudinアイソフォームを欠損しても、タイトジャンクションの構造は維持されたままである。そこで、すべてのClaudinアイソフォームを欠損した上皮細胞株を樹立することにした。CRISPR-Cas9法を用いた遺伝子編集によって、すべてのClaudinを欠損したClaudin null細胞の樹立に成功している。現在、Claudin null細胞での細胞膜脂質の局在や脂質組成の変化を解析中である。また、前年度までに行っていたアドヘレンスジャンクションの必須構成タンパク質であるα-cateninを欠損したα-catenin KO細胞を利用したタイトジャンクション形成機構の解析に関しても、新たな知見を得ることができた。タイトジャンクションの形成には、アドヘレンスジャンクションの形成が先立って必要である。これまでに、アドヘレンスジャンクションの形成による細胞膜脂質の局在の変化がタイトジャンクションの形成を誘導することを報告してきたが、細胞骨格の配向性等の変化もタイトジャンクションの形成に必要であるという予備的なデータを得つつあるので、その点に関しても検討を進めていきたい。

In the current year and the previous year, it is clear that there are significant differences in the number of carbon compounds in the field. The number of fatty acids is more than 20%. There are significant differences in the number of fatty acids in the field. Do you know if you want to make sure that you are not in the market, you are not in the market? you know, when you're in the field of fat, you know, in the field of fat, you know, you know, you know, If you don't have a hand, you have to take a test. This is the first time that a copy of the Claudin is generated. As soon as you Claudin, you need to make sure that you don't know what's going on, and that you need to make sure that you can maintain your performance. The epithelial cell line was isolated from the Claudin cell line. In the CRISPR-Cas9 method, you can use the data subset to edit the data, and the Claudin is short of the Claudin null cell to confirm the success. At present, Claudin null cell membrane lipid metabolism is very important in the analysis of lipid metabolism. In the previous year, we need to make sure that we have a problem with catenin and that we need to make use of the data to establish a mechanism to analyze the information in the system, and to get the information from each other. Please tell me that it is necessary to make a decision in the first place. The formation of cell membrane lipids, cytoskeleton, cellular bone distribution, and so on. Please do not wait until the end of the day.