細菌性食中毒に対する多価ワクチンの開発および高感度診断技術基盤の確立

细菌性食物中毒多价疫苗研制及高灵敏诊断技术平台建立

• 批准号: 18J00556
• 负责人: 細見 晃司
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18J00556/
• 关键词: 細菌性食中毒; ワクチン; 志賀毒素; ウエルシュ菌エンテロトキシン; カンピロバクター

本研究では細菌性食中毒に対する新規の多価ワクチンの開発を目的に、まず、ウエルシュ菌エンテロトキシン（CPE）の受容体結合に関わるC末端領域（C-CPE）と腸管出血性大腸菌から産生されるベロ毒素（VT2、別名：志賀毒素Stx2）の受容体結合領域であるBサブユニット（Stx2B）の融合タンパク質のワクチンとしての有用性を評価した。その結果、融合タンパク質を免疫することで、ウエルシュ菌エンテロトキシンとベロ毒素に対する抗体が誘導されており、さらにin vitroおよびin vivoでの中和活性を確認できた。具体的には、C-CPEは本来抗原性の低い分子であるため、単独で免疫してもC-CPE特異的な免疫応答はほとんど誘導されず、CPEに対する中和抗体が産生されない。しかし、Stx2Bと融合したタンパク質（Stx2B -C-CPE）をマウスに皮下で免疫すると、C-CPE特異的な免疫応答が誘導され、中和活性をもつC-CPE特異的な血中IgG抗体が産生された。さらに、融合パートナーとして用いたベロ毒素に対するワクチンについても、毒素に対する十分な生体防御を示す抗体産生を誘導することが出来た。次に、カンピロバクターに対するワクチン抗原候補を検索する目的で、腸管上皮細胞株を用いた感染モデルにおいてカンピロバクターの感染を防御できる抗体を選定し、本抗体が認識している分子を同定した。さらに組換えタンパク質として大腸菌に発現・精製した本分子をマウスに免疫したところ、血清中に本分子特異的な抗体産生が誘導できることを確認した。このように、カンピロバクター感染症に対するワクチン開発に向けた有効なワクチン抗原の同定に成功した。

In this study, we evaluated the usefulness of the C-terminal domain (C-CPE) of the receptor binding domain for the production of Shiga toxin (VT2, alias: Shiga toxin Stx2) by intestinal hemorrhagic E. coli in the development of new regulations for bacterial food poisoning. The results of the study confirmed that the antibody against the fusion protein was induced in vitro and neutralized in vivo. Specifically, C-CPE is an antigenically low molecular protein that produces neutralizing antibodies to C-CPE specific immune responses. Stx2B fusion protein (Stx2B-C-CPE) is used to induce subcutaneous immune response, C-CPE specific immune response, and neutralizing activity to produce IgG antibodies in C-CPE specific blood. In addition, the fusion protein can be used to induce the production of antibodies against the toxin. In addition, the antibody can be used to identify the molecular identity of intestinal epithelial cell lines infected with the antigen candidate. In addition, the production of antibodies specific to this molecule in serum was confirmed. The development of this disease has been successful.

项目成果

Immunostimulatory effect on dendritic cells of the adjuvant-active exopolysaccharide from Leuconostoc mesenteroides strain NTM048

• DOI: 10.1080/09168451.2018.1482195
• 发表时间: 2018-01-01
• 期刊: BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 1.6
• 作者: Matsuzaki, Chiaki;Takagaki, Chikahiro;Hisa, Keiko
• 通讯作者: Hisa, Keiko

Immunological association of inducible bronchus-associated lymphoid tissue organogenesis in Ag85B-rHPIV2 vaccine-induced anti-tuberculosis mucosal immune responses in mice.

• DOI: 10.1093/intimm/dxy046
• 发表时间: 2018-09-25
• 期刊: International immunology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Nagatake T;Suzuki H;Hirata SI;Matsumoto N;Wada Y;Morimoto S;Nasu A;Shimojou M;Kawano M;Ogami K;Tsujimura Y;Kuroda E;Iijima N;Hosomi K;Ishii KJ;Nosaka T;Yasutomi Y;Kunisawa J
• 通讯作者: Kunisawa J

ヒトマイクロバイオームビッグデータと健康医療への応用

人体微生物组大数据及其在医疗保健中的应用

• 发表时间: 2018
• 作者: 細見晃司;國澤純
• 通讯作者: 國澤純

Development of a bivalent food poisoning vaccine: augmented antigenicity of the C-terminus of Clostridium perfringens enterotoxin by fusion with the B subunit of Escherichia coli Shiga toxin 2

开发二价食物中毒疫苗：通过与大肠杆菌志贺毒素 2 的 B 亚基融合，增强产气荚膜梭菌肠毒素 C 末端的抗原性

• DOI: 10.1093/intimm/dxy071
• 发表时间: 2018
• 期刊: International Immunology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Hosomi Koji;Hinenoya Atsushi;Suzuki Hidehiko;Nagatake Takahiro;Nishino Tomomi;Tojima Yoko;Hirata So-ichiro;Matsunaga Ayu;Kondoh Masuo;Yamasaki Shinji;Kunisawa Jun
• 通讯作者: Kunisawa Jun

油と腸内フローラから考える健康科学の新展開

基于油脂和肠道菌群的健康科学新进展

• 发表时间: 2019
• 作者: 細見晃司;國澤純
• 通讯作者: 國澤純