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脂肪細胞由来液性因子による肥満高血圧の分子機序解明及び新規バイオマーカーの開発

阐明脂肪细胞源性体液因子引起肥胖和高血压的分子机制并开发新的生物标志物

基本信息

批准号：
18J11985
负责人：
島田洋樹
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18J11985/
关键词：
高血圧肥満副腎肥満高血圧アルドステロン CYP11B2

项目摘要

本研究では副腎アルドステロン合成酵素（CYP11B2）発現誘導能を有する脂肪細胞由来の未知因子を肥満高血圧の責任因子として同定し、その副腎への作用機序を解析することにより肥満高血圧発症の分子機序を解明することを目的としている。脂肪細胞への分化能を有するマウス線維芽細胞由来3T3-L1細胞を脂肪細胞へと分化させ、培養上清を取得した。次に、ヒト副腎腫瘍由来H295R細胞に脂肪細胞より取得した培養上清を添加し、CYP11B2の発現誘導を指標に分子量による分画を行った。その結果、CYP11B2発現誘導を担う特定の画分を見出した。次にCYP11B2発現誘導能を有する画分を質量分析装置により解析し、液性因子の同定を行った。その結果52種の候補因子を同定した。さらに、52種の候補因子の中からシグナルペプチドの有無をSignalP4.1により推定し、シグナルペプチドを有すると考えられた12種を同定することができた。また、CYP11B2の発現誘導を指標にイオン交換クロマトグラフィーを用いた分画を行ったところ、複数のCYP11B2発現誘導活性をもつ画分を取得することができた。この活性画分に含まれると考えられる因子と前述の12種についてHEK293T細胞を用いた分泌蛋白質の大量発現系を構築し、因子を大量に取得した。精製した因子をH295R細胞に順次添加し、CYP11B2の遺伝子発現を確認したところ、数種類の因子にCYP11B2発現誘導活性があることを見出した。

The aim of this study is to analyze the molecular mechanism of hyperlipidemia by analyzing the molecular sequence of hyperlipidemia. In this study, we found that there is an unknown factor, hyperlipidemia, hyperlipidemia. The differentiation of adipose cells can be induced by the origin of 3T3-L1 cells, adipose cells, differentiation cells and culture supernatants. The secondary and secondary factors are derived from the H295R cell fat cell, the supernatant is added, and the CYP11B2 is shown to indicate the molecular weight. The results show that the CYP11B2 system is responsible for the output of a specific picture. The secondary CYP11B2 system shows that there is a device for quantitative analysis and analysis, and the liquid factor is the same as the fixed line. The results showed that 52 waiting factors were the same. There is a presumption that there is no SignalP4.1 message in the 52-year-old waiting factor, and there is an indication that the data is not valid. The CYP11B2 command indicates that you can use the command to separate the lines of the drawing, and the complex number of the CYP11B2 to show the activity of the drawing. A lot of proteins are secreted by the 12 kinds of HEK293T cells mentioned above, and a large number of factors are obtained. Factor H295R has been added for several times, CYP11B2 has been added for several times, and several factors, such as CYP11B2, have been confirmed.