脂肪細胞由来液性因子による肥満高血圧の分子機序解明及び新規バイオマーカーの開発
阐明脂肪细胞源性体液因子引起肥胖和高血压的分子机制并开发新的生物标志物
基本信息
- 批准号:18J11985
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2018
- 资助国家:日本
- 起止时间:2018-04-25 至 2020-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では副腎アルドステロン合成酵素(CYP11B2)発現誘導能を有する脂肪細胞由来の未知因子を肥満高血圧の責任因子として同定し、その副腎への作用機序を解析することにより肥満高血圧発症の分子機序を解明することを目的としている。脂肪細胞への分化能を有するマウス線維芽細胞由来3T3-L1細胞を脂肪細胞へと分化させ、培養上清を取得した。次に、ヒト副腎腫瘍由来H295R細胞に脂肪細胞より取得した培養上清を添加し、CYP11B2の発現誘導を指標に分子量による分画を行った。その結果、CYP11B2発現誘導を担う特定の画分を見出した。次にCYP11B2発現誘導能を有する画分を質量分析装置により解析し、液性因子の同定を行った。その結果52種の候補因子を同定した。さらに、52種の候補因子の中からシグナルペプチドの有無をSignalP4.1により推定し、シグナルペプチドを有すると考えられた12種を同定することができた。また、CYP11B2の発現誘導を指標にイオン交換クロマトグラフィーを用いた分画を行ったところ、複数のCYP11B2発現誘導活性をもつ画分を取得することができた。この活性画分に含まれると考えられる因子と前述の12種についてHEK293T細胞を用いた分泌蛋白質の大量発現系を構築し、因子を大量に取得した。精製した因子をH295R細胞に順次添加し、CYP11B2の遺伝子発現を確認したところ、数種類の因子にCYP11B2発現誘導活性があることを見出した。
The aim of this study is to elucidate the molecular mechanism of hypertension-related diseases by identifying unknown factors responsible for the induction of adipocyte origin by an accessory kidney synthase (CYP11B2). Adipocyte differentiation is possible. Cell culture supernatant is obtained from 3T3-L1 cells The secondary kidney tumor originated from H295R cells and was isolated from adipocytes by culture supernatant addition, CYP11B2 expression and molecular weight analysis. The results showed that CYP11B2 expression was induced and specific components were observed. CYP11B2 production induction energy can be determined by mass spectrometry, and the identity of liquid factors can be determined. The results of 52 candidate factors are the same. In addition, among the 52 candidate factors, the presence or absence of the candidate factor is signalP4.1, and the presence or absence of the candidate factor is determined by the examination of the candidate factor. CYP11B2 expression induction index is used to measure CYP11B2 expression induction activity. These active components include the factors mentioned above, and the HEK293T cells are used to secrete a large number of proteins and to construct a large number of factors The purification factor was added sequentially to H295R cells, CYP11B2 gene expression was confirmed, and CYP11B2 gene expression induction activity of several kinds of factors was observed.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Effects of Adipocyte-derived Factors on the Adrenal Cortex.
脂肪细胞衍生因子对肾上腺皮质的影响。
- DOI:10.2174/1874467212666191015161334
- 发表时间:2020
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shimada H;Noro E;Suzuki S;Sakamoto J;Sato I;Parvin R;Yokoyama A;Sugawara A
- 通讯作者:Sugawara A
未知の脂肪細胞由来アルドステロン合成酵素(CYP11B2)発現誘導因⼦の探索
寻找诱导脂肪细胞源性醛固酮合酶(CYP11B2)表达的未知因素
- DOI:
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:坂本純;島田洋樹;島田洋樹
- 通讯作者:島田洋樹
未知の脂肪細胞由来因子による副腎CYP11B2発現誘導機序の解明
阐明未知脂肪细胞衍生因子诱导肾上腺 CYP11B2 表达的机制
- DOI:
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:坂本純;島田洋樹
- 通讯作者:島田洋樹
An approach to identify the undetermined adipocyte-derived factor(s) that stimulate aldosterone synthase gene (CYP11B2) expression
一种鉴定刺激醛固酮合酶基因 (CYP11B2) 表达的未确定脂肪细胞衍生因子的方法
- DOI:
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shimada H;Noro E;Suzuki S;Sakamoto J;Sato I;Parvin R;Yokoyama A;Sugawara A;Hiroki Shimada
- 通讯作者:Hiroki Shimada
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