チャハマキで発見された新規RNAウイルスによる性特異的致死現象の機構解明

阐明 Chahamaki 中发现的新型 RNA 病毒引起的性别特异性致死机制

• 批准号: 22KJ1247
• 负责人: 高松 巧
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1247/
• 关键词: 昆虫; オス殺し; ウイルス; 性比異常

オス殺しは母系伝播する因子が伝播率を増強するために用いる戦略であり、共生細菌ボルバキアなどで広く知られている一方、母系伝播するウイルスにより引き起こされるオス殺しの報告は非常に少ない。本研究では、茶樹の害虫であるチャハマキに感染するウイルスがオスを選択的に殺す機構を解明する。2022年度はオス殺しを引き起こす遺伝子の探索および、ウイルス感染オス／非感染オス間における遺伝子・タンパク質の発現変化を解析した。2022年に茨城県常総市においてチャハマキを採集し、ウイルスの感染を調査した。さらに注射接種と併せてウイルスの一部分節が欠損した系統を作出した。この系統のふ化後から成虫期にかけての生存率を調査したところ、幼虫期においてオスがすべて致死することから、これらの欠損した分節はオス殺しに関連していないことが示唆された。ウイルスの構造タンパク質を同定するために、密度勾配遠心法を用いてウイルス粒子を精製した。電子顕微鏡(TEM)を用いて粒子が観察されたサンプルに対してLC-MS/MSを行うことで構造タンパク質の候補を同定した。ウイルス感染系統および非感染系統の致死齢においてトランスクリプトーム解析（RNA-seq）およびプロテオーム解析（LC-MS/MS）を行った。その結果ウイルス感染オスとウイルス非感染オス間では一部遺伝子の発現が変化することが明らかになり、この傾向はプロテオーム解析においても一致する結果となった。一方でウイルス感染メスにおいてはウイルス感染オスで見られたような遺伝子の発現変化は見られなかった。

雄性杀戮是一种母体传播因素使用的一种策略来提高传播率，尽管在共生细菌中广为人知，但由母体传播病毒引起的男性杀害却很少有报道。这项研究将阐明感染茶树害虫的病毒，有选择地杀死男性。在2022年，我们研究了导致雄性杀死的基因，并分析了病毒感染和未感染的雄性之间的基因和蛋白质表达的变化。 2022年，我们在伊巴拉基县乔索市收集了查哈马基，以调查病毒的感染。此外，除了注射疫苗外，还创建了谱系，其中缺少部分病毒。这种血统的调查率从陷阱后到成年，表明所有雄性在幼虫阶段都致命，这表明这些缺失的细分市场与男性杀戮无关。为了鉴定病毒的结构蛋白，使用密度梯度离心纯化病毒颗粒。通过在使用电子显微镜（TEM）观察到颗粒的样品上进行LC-MS/MS来鉴定结构蛋白的候选物。转录组分析（RNA-SEQ）和蛋白质组学分析（LC-MS/MS）在病毒感染和未感染的菌株的致命年龄进行。结果，揭示了一些基因在病毒感染的雄性和感染病毒感染的雄性之间的表达，并且这种趋势在蛋白质组分析中也是一致的。另一方面，在病毒感染的雌性中没有观察到基因表达的变化。

项目成果

オスゴロシウイルスの性情解析

Osgoroshivirus 的性别分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 高松巧;伊藤喜之;茂野稜;呉建甫;北浦健太朗;井上真紀
• 通讯作者: 井上真紀

オスゴロシウイルスから産生される タンパク質の探索

寻找 Osgoroshivirus 产生的蛋白质

• 发表时间: 2022
• 作者: 高松巧;伊藤喜之;茂野稜;呉建甫;北浦健太朗;井上真紀;高松巧・茂野稜・伊藤喜之・井上真紀
• 通讯作者: 高松巧・茂野稜・伊藤喜之・井上真紀