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細胞接着性膜タンパク質を搭載したエンベロープ型人工ウイルスキャプシドの構築

负载细胞粘附膜蛋白的有包膜人工病毒衣壳的构建

基本信息

批准号：
22KJ2297
负责人：
古川寛人
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

今年度の研究では、従来のワクチン材料では困難であった、抗原とアジュバントを自在にかつ均一に搭載させた新規ワクチン材料の開発を検討した。具体的には、乳がん抗原ペプチドCH401ペプチドと脂質アジュバントα-GalCerを提示したエンベロープウイルスレプリカを創製し、モデルマウスへの投与及び免疫評価を行った。Fmoc固相法により合成したβ-Annulus-EE-GGGCGペプチドにBismaleimide-PEG12リンカーを介してCys-CH401ペプチドを連結することでβ-Annulus-EE-CH401ペプチドを合成した。β-Annulus-EE-CH401の自己集合挙動をDLS・ζ電位・TEMにより評価した結果、表面がアニオン性で74±26 nmの人工ウイルスキャプシドの形成が確認された。この球状集合体にα-GalCer/DOTAP/DOPC混合脂質を複合化した結果、粒径が97±28 nmに増大し、ζ電位がカチオン性にシフトした。またTEMにより、100 nm程度の球状粒子表面にCH401ペプチドと思われる5 nm程度のドット状構造が多数観察された。以上の結果より、抗原/脂質アジュバント搭載エンベロープウイルスレプリカの構築が示唆された。次に、モデルマウスへの腹腔投与後の免疫活性化評価では抗原特異的な強力な免疫活性が確認された。さらに、α-GalCerの搭載によりアレルギー応答に関与するサイトカイン放出の抑制に成功した。以上の結果より、完全人工合成によりボトムアップかつ自在に機能を付与可能な新規ワクチン材料の開発に成功した。

This year's research is aimed at exploring the development of new materials that are difficult to carry out, antigen free and uniform. Specific antigen-specific CH401-specific lipid profile and α-GalCer profile are suggested for the creation, administration and immune evaluation of antigen-specific lipid profiles. Fmoc solid-phase method is used to synthesize β-Annulus-EE-GGGCG bismaleimide-PEG12-based chain.β-Annulus-EE-CH401's self-assembly motion was evaluated by DLS, zeta potential, TEM, and the formation of artificial surface separation at 74±26 nm was confirmed As a result, the particle size of α-GalCer/DOTAP/DOPC mixed lipids increased to 97±28 nm, and the zeta potential increased to 100 nm. TEM observation of CH401 particles on the surface of spherical particles of about 100 nm in diameter and of about 5 nm in diameter was mostly observed. As a result, the antigen/lipid profile was developed. In addition, the immune activity of the antigen-specific and potent immune activity was confirmed by immunochemical evaluation after intraperitoneal administration of the antigen-specific and potent immune activity. In addition, α-GalCer's loading and unloading were successfully suppressed. The above results are completely synthetic and give rise to the possibility of developing new materials.