疾患組織選択的にゲノム編集分子を送達可能な"着せ替え型"超分子キャリアの構築

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本年度は、以下の検討を実施した。1) 昨年度までに構築した amino-PRX の適用拡大検討(核酸医薬やmRNAおよびタンパク質性薬物)および 2) 組織選択性を付与する第二キャリアの調製、構造解析および有用性評価。1) の検討においては、昨年度までに 2 種類のゲノム編集分子 (Cas9 RNP および Cpf1 RNP) デリバリーキャリアとしての有用性を明らかにしてきたが、本年度の検討において、核酸医薬 (アンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNA) や負電荷を有するタンパク質性薬物デリバリーキャリアとしての有用性も明らかにすることができた。特に、そのデリバリー効率や安全性は市販品の導入用試薬を凌駕するものであり、ポリロタキサンの動的特性を活かして、ゲノム編集分子、核酸医薬およびタンパク質性薬物のデリバリープラットフォームを構築できた。2) の検討では、リガンドとポリロタキサンの間に適切なリンカーを導入することで、その水溶性の改善に成功し、水溶性担保のために、リガンド修飾率が不十分となり、十分な組織選択性の付与を行えなかった、という昨年度の課題を解決することができた。その結果、肝臓標的型およびがん標的型の 2 種の第二キャリアを構築し、いずれも Cas9 RNP の標的指向性を向上させることを明らかにした。現在は、第二キャリア/amino-PRX/Cas9 RNP 複合体の in vivo における有用性について評価している。