NR4aを用いたT細胞の疲弊解除

使用 NR4a 逆转 T 细胞耗竭

• 批准号: 22KJ2710
• 负责人: 中川原 賢亮
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2710/
• 关键词: 腫瘍免疫; CAR-T細胞; 肺癌; T細胞の疲弊; 代謝

本年度において、T 細胞疲弊の調節因子として知られる NR4a に着目し、NR4a をノックアウトした CAR T 細胞を作成し、フローサイトメトリーにて疲弊化に関連する細胞表面マーカーの測定、in vitro でのがん細胞との共培養後の killing assay モデルによる抗腫瘍効果の検討を行った。上記試験管モデルでの実験により、NR4a ノックアウト CAR T 細胞の高い抗腫瘍効果を実証し、年度の中盤からはNSGマウスを用いて、マウスモデルにおけるNR4a ノックアウトCAR T細胞の抗腫瘍効果を評価した。同実験系においてもNR4a ノックアウト CAR T 細胞は強い抗腫瘍効果を示すことが明らかになった。またNR4a ノックアウト CAR T 細胞の代謝能に関しても、Flux analysis、Mito Trackerを用いて評価を行い、NR4a ノックアウト CAR T 細胞は、ミトコンドリアの活性化と活性酸素の発現上昇、酸化的リン酸化の亢進による強いATP産生能を有する事を実証した。同CAR T 細胞の RNA シークエンスの解析でも、NR4a ノックアウト CAR T 細胞はミトコンドリア関連遺伝子の発現上昇、memory phenotype に関連する遺伝子の発現亢進を認めた事に加え、癌細胞との共培養後の RNA シークエンスでは、IFN-γに関連するpathwayの亢進と疲弊関連遺伝子の発現低下を認め、これまでの研究と矛盾しない結果を確認した。今後はシングルセルRNAシークエンスを行い、NR4a ノックアウト CAR T 細胞の遺伝子発現を詳細に評価することに加え、NR4a がミトコンドリアに及ぼす影響とその関連遺伝子について研究を継続する予定である。成果報告として昨年末に、第51 回日本免疫学会学術集会での筆頭演者でのポスター発表と学内講演を行った。

This year, NR4a, a regulatory factor for T cell exhaustion, was detected in CAR T cells, and the correlation between NR4a and CAR T cell exhaustion was detected in vitro. The results of NR4a anti-tumor activity of CAR T cells were evaluated in the middle of the year. In the same way, NR4a cells can be used to express anti-tumor effects. The metabolic energy of NR4a T cells was evaluated by Flux analysis and Mito Tracker. The activation of NR4a T cells, the increase of active acid production and the increase of acidified ATP production were demonstrated. Analysis of CAR T cell RNA profile, NR4a profile, increased expression of CD4 +-associated genes, increased expression of CD4 +-associated pathway, decreased expression of CD4 +-associated genes, increased expression of CD4 +-associated genes, decreased expression of CD4 +-associated genes, increased expression of CD4 +- In the future, the development of CAR T cells will be evaluated in detail, including the development of NR4a and its impact on related gene research. The results were presented at the end of last year and the 51st Japan Immunology Society Academic Conference.

项目成果

日本人COVID-19患者におけるトシリヅマブ使用症例の臨床的特徴の検討

日本 COVID-19 患者托珠单抗使用案例的临床特征检查

• 发表时间: 2022
• 作者: Mise-Omata;S.;M. Ikeda;M. Takeshita;Y. Uwamino;M. Wakui;T. Arai;A. Yoshifuji;K. Murano;H. Siomi;K. Nakagawara;M. Ohyagi;M. Ando;N. Hasegawa;H. Saya;M. Murata;K. Fukunaga;H. Namkoong;X. Lu;S. Yamasaki;and A. Yoshimura.;Kensuke Nakagawara;中川原賢亮;中川原賢亮
• 通讯作者: 中川原賢亮

Memory B Cells and Memory T Cells Induced by SARS-CoV-2 Booster Vaccination or Infection Show Different Dynamics and Responsiveness to the Omicron Variant

• DOI: 10.4049/jimmunol.2200525
• 发表时间: 2022-12-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Mise-Omata, Setsuko;Ikeda, Mari;Yoshimura, Akihiko
• 通讯作者: Yoshimura, Akihiko

Antitumor efficacy of NR4a knock out HER2 CAR-T cell therapy for solid tumors

NR4a敲除HER2 CAR-T细胞疗法治疗实体瘤的抗肿瘤功效

• 发表时间: 2022
• 作者: Mise-Omata;S.;M. Ikeda;M. Takeshita;Y. Uwamino;M. Wakui;T. Arai;A. Yoshifuji;K. Murano;H. Siomi;K. Nakagawara;M. Ohyagi;M. Ando;N. Hasegawa;H. Saya;M. Murata;K. Fukunaga;H. Namkoong;X. Lu;S. Yamasaki;and A. Yoshimura.;Kensuke Nakagawara
• 通讯作者: Kensuke Nakagawara

COVID-19と細菌感染合併症例の臨床的特徴の検討

COVID-19临床特征及细菌感染并发症的检查

• 发表时间: 2022
• 作者: Mise-Omata;S.;M. Ikeda;M. Takeshita;Y. Uwamino;M. Wakui;T. Arai;A. Yoshifuji;K. Murano;H. Siomi;K. Nakagawara;M. Ohyagi;M. Ando;N. Hasegawa;H. Saya;M. Murata;K. Fukunaga;H. Namkoong;X. Lu;S. Yamasaki;and A. Yoshimura.;Kensuke Nakagawara;中川原賢亮
• 通讯作者: 中川原賢亮