Creation of the tailor-made system for antibody production by using an autoantigenic complex

使用自身抗原复合物创建用于抗体生产的定制系统

• 批准号: 23657087
• 负责人: UCHIUMI Toshio
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23657087/
• 关键词: リボソーム; 抗P自己抗体; 自己抗原; P蛋白質; 自己免疫; 抗体産出系; 抗リボソーム抗体; 国際情報交換、香港; 抗原抗体反応; P1/P2; リボソームタンパク質; 抗Ｐ自己抗体; ストーク複合体; 抗原・抗体反応

The aim of this study is to clarify the relationship between the structure and antigenicity of ribosomal autoantigen (P0-P1-P2 complex), and to develop a useful antibody-production system. Epitope analysis of the ribosomal autoantigen identified the 3 amino acids at the C-terminus, which is shared by P0/P1/P2 and responsible for anti-P recognition. It was also found that phosphorylation at Ser residues adjacent to the 3 amino acids enhanced the anti-P binding, suggesting that phosphorylation of the autoantigen is related to the antigenicity. We also found that aP1, the archaeal homologue of human P1/P2, forms a stable tetramer and that immunization of this tetramer resulted in production of antibodies to the conserved C-terminal part. When the C-terminal amino acid sequence was replaced with a sequence of another ribosomal protein, the antibody specific to the introduced sequence was produced. We thus developed a novel method to produce efficiently the antibody for a desired sequence.

本研究的目的是阐明核糖体自身抗原（P0-P1-P2复合物）的结构与抗原性之间的关系，并建立一个有用的抗体生产系统。核糖体自身抗原的表位分析鉴定了C-末端的3个氨基酸，其由P0/P1/P2共享并负责抗P识别。同时还发现，与3个氨基酸相邻的Ser残基的磷酸化增强了抗P结合，表明自身抗原的磷酸化与抗原性有关。我们还发现，aP 1，人类P1/P2的古细菌同源物，形成一个稳定的四聚体，免疫这种四聚体导致产生抗体的保守的C-末端部分。当C-末端氨基酸序列被另一种核糖体蛋白质的序列取代时，产生了对引入的序列特异的抗体。因此，我们开发了一种新的方法，以有效地产生所需序列的抗体。

项目成果

真核リボソームstalk に存在する2対のヘテロ二量体の翻訳伸長反応における機能の非等価性

真核核糖体茎中两对异二聚体翻译延伸反应的功能不等同性

• 发表时间: 2011
• 作者: 馬場健太朗;姚閔;田中勲;内海利男
• 通讯作者: 内海利男

ヒトリボソームP0/P1/P2ストークタンパク質が共有するC 末端部位の翻訳伸長因子aEF-1α/eEF-2 との相互作用

与人核糖体 P0/P1/P2 茎蛋白共享的 C 端区域翻译延伸因子 aEF-1α/eEF-2 的相互作用

• 发表时间: 2012
• 作者: 小野塚美穂;馬場健太朗;三好智博;伊東孝祐;内海利男
• 通讯作者: 内海利男

Peptidyl-tRNA hydrolase の基質認識および触媒反応の構造基盤

肽基-tRNA水解酶底物识别和催化的结构基础

• 发表时间: 2013
• 作者: 伊東孝祐;村上僚;望月正弘;斉浩;清水義宏;三浦謹一郎;上田卓也;内海利男
• 通讯作者: 内海利男

好熱性古細菌翻訳因子によるin vitro翻訳系の確立

利用嗜热古菌翻译因子建立体外翻译系统

• 发表时间: 2013
• 作者: 鈴木 隆寛;本田 貴嘉;村上 僚;佐藤 駿平;三好 智博;伊東 孝祐;内海 利男
• 通讯作者: 内海 利男

古細菌リボソームストークタンパク質aP1と翻訳伸長因子aEF-1α間の相互作用とaEF-1βによる調節

古菌核糖体茎蛋白aP1与翻译延伸因子aEF-1α之间的相互作用以及aEF-1β的调节

• 发表时间: 2012
• 作者: 鈴木隆寛;他
• 通讯作者: 他