Novel signaling pathway in Patched1.

Patched1 中的新信号通路。

• 批准号: 23657135
• 负责人: KAWAHARA Hiroyuki
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23657135/
• 关键词: Patched1; GLI; ヘッジホッグ; ユビキチン; プロテアソーム; 蛋白質品質管理

Patched 1 (Ptc1) is a polytopic receptor protein that is essential for growth and differentiation. Its extracellular domains accept its ligand, Sonic Hedgehog, while the function of its C-terminal intracellular domain is largely obscure. In this study, we stably expressed human Ptc1 protein in HeLa cells and found that it is subjected to proteolytic cleavage at the C-terminus, resulting in the generation of soluble C-terminal fragments. These fragments accumulated in the nucleus, while the N-terminal region of Ptc1 remained in the cytoplasmic membrane fractions. Using an anti-Ptc1 C-terminal domain antibody, we provide conclusive evidence that C-terminal fragments of endogenous Ptc1 accumulate in the nucleus of C3H10T1/2 cells. Similar nuclear accumulation of endogenous C-terminal fragments was observed not only in C3H10T1/2 cells but also in mouse embryonic primary cells. Importantly, the C-terminal fragments of Ptc1 modulate transcriptional activity of Gli1. Although Ptc1 protein was originally thought to be restricted to cell membrane fractions, our findings suggest that its C-terminal fragments can function as an alternative signal transducer that is directly transported to the cell nucleus.

Patched1(Ptc1)是一种多态受体蛋白，对生长和分化是必不可少的。它的胞外区可以接受它的配体Sonic Hedgehog，而它的C末端胞内区的功能在很大程度上是未知的。在本研究中，我们在HeLa细胞中稳定表达了人Ptc1蛋白，并发现它在C-末端发生了蛋白水解性切割，导致了可溶性C-末端片段的产生。这些片段聚集在细胞核中，而Ptc1的N末端区域保留在细胞膜部分。利用抗Ptc1 C-末端结构域的抗体，我们提供了确凿的证据，证明内源性Ptc1的C-末端片段在C3H10T1/2细胞的细胞核中积聚。不仅在C3H10T1/2细胞中，而且在小鼠胚胎原代细胞中也观察到类似的内源性C末端片段的核积聚。重要的是，Ptc1的C末端片段调节Gli1的转录活性。虽然Ptc1蛋白最初被认为仅限于细胞膜部分，但我们的发现表明，它的C末端片段可以作为另一种信号转导，直接运输到细胞核。

项目成果

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実験医学、第29巻、７月増刊号「細胞内のリノベーション機構：タンパク質分解系による生体制御」

实验医学，第29卷，7月特刊“细胞内翻新机制：蛋白质降解系统的生物控制”

• 发表时间: 2011
• 作者: 川原裕之;南亮介
• 通讯作者: 南亮介

12回膜貫通タンパク質Patched1 のアッセンブリと品質管理メカニズム

12次跨膜蛋白Patched1的组装及质量控制机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 高橋俊樹;横田直人;川原裕之
• 通讯作者: 川原裕之

新規Patched1結合タンパク質を介したShh情報伝達経路の調節機構

新型Patched1结合蛋白介导的Shh信号通路的调控机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 岩澤 成晃;生沼 泉;根岸 学;岩崎茜
• 通讯作者: 岩崎茜

Emerging roles in quality control for nascent polypeptides

新生多肽质量控制中的新兴作用

• 发表时间: 2013
• 期刊: J. Biochem
• 作者: Kawahara;H.;Minami;R. and Yokota;N.
• 通讯作者: N.