高発癌性ブルーム症候群細胞の癌化とヌードマウス移植による癌原物質の検定法確立

高致癌布卢姆综合征细胞裸鼠移植癌变及致癌物测定方法的建立

• 批准号: 61840022
• 负责人: 白石 行正
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-61840022/
• 关键词: 染色体異常; 姉妹染色分体交換; 発癌物質; B-リンパ細胞株; ブロモデオキシウリジン

本研究では、従来のSCEを指標とした物質の発癌性を検定する方法についてBS患者由来のBリンパ細胞株を用い、より簡単で確実且つ鋭敏な方法を開発すべく研究を行なった。これまで、BS患者末梢血リンパ球にEpstein Barr(EB)ウイルスを感作して多数のBリンパ細胞株を樹立してきたが、SCE頻度、染色体構成により3種類に分類した。タイプ【I】は、BS由来でありながら正常レベルSCE頻度、正常染色体構成(核型)を有する。タイプ【II】は、高頻度SCE形質は保有しながら正常核型を有する。タイプ【III】は、高頻度SCE形質、異常核型を有する。これらの細胞株を用い、種々の発癌剤を検索した結果、BSタイプ【I】の細胞は発癌物質に対する感受性は正常細胞とほぼ同じ程度であり、BSタイプ【II】細胞は培養下でS9mixを必要としない発癌剤については有効であったが、S9mixを必要とする発癌剤については必ずしも有効ではなかった。興味ある事実はBSタイプ【III】の細胞株はこれまで調べた17種類の内、SCE増加の程度の少し弱いものも認められるもののすべてS9mixの存在なしに検定できる利点があることを突き止めた。検定方法としては、BSならびに正常リンパB細胞(1-2x【10^6】cells)にBrdU5.0μg/mlを加え、24時間後に被測定物質もしくは既知の発癌物質0.004-400μg/mlを加え、さらに24時間培養した後、染色体標本を作製した。この染色体標本についてSCE分染を行ない、ヘキスト、ギムザ染色された標本でSCEをカウントし、BSと正常細胞について比較する。BSタイプ【I】と正常細胞はBrdUによるSCEが細胞あたり5.0個程度であるのに対し、BSでは約70個のSCEが見られる。そして、発癌物質処理では正常ならびにBSタイプ【I】ではたかだか10個であるのに、BSタイプ【II】,【III】では70個のSCEの上にさらに細胞あたり70個SCEの増加が見られる。BSタイプ【III】は、発癌物質検定には非常に有益な細胞株であることが判明した。

In this study, SCE method was used to determine the carcinomatous nature of BS patients. In this study, cell lines were confirmed and sensitive methods were used to conduct a clinical study. Most of the peripheral blood samples of patients with BS were divided into three categories: Epstein Barr (EB), cell lines, SCE, chromosome classification and so on. The cause of BS is abnormal, the degree of SCE is normal, and the karyotype of normal chromosome is abnormal. The normal karyotype is known to be in the shape of high-grade SCE, normal karyotype and normal karyotype. III, high degree SCE, eukaryotype. The results of cell line screening, cancer cell line screening, BS cell culture, cancer cell sensitivity, normal cell sensitivity, BS cell culture, S9mix cell culture, cancer cell culture, cancer cell culture, There is a significant increase in the level of SCE in the BS system [III]. In this category, there is a significant increase in the level of SCE. There are significant differences between the two groups. Determine the method to determine the normal cell temperature (1-2x [10 ^ 6] cells) BrdU5.0 μ g

项目成果

Shiraishi,Y.: Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (1987)

白石，Y.：Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

白石行正: 日本臨床社. (1987)

白石幸正：日本菱车 (1987)

白石行正: 小児外科. (1987)

白石幸正：小儿外科（1987）。

Shiraishi,Y.: Mutation Research. (1987)

白石，Y.：突变研究。

Bamezai,R.: Experimental Cell Research. 164. 163-173 (1986)

Bamezai，R.：实验细胞研究。