Sulforaphane inhibits hepatic cncer growth via the Nrf2 signaling cascade.

萝卜硫素通过 Nrf2 信号级联抑制肝癌生长。

• 批准号: 18K15793
• 负责人: 佐藤 慎哉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-12-19 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15793/
• 关键词: スルフォラファン; 肝癌; 抗腫瘍効果; ソラフェニブ; sulforaphane; Nrf2; 血管新生

in vivo実験としてヒト肝癌細胞株（HepG2、Huh-7）をnude mouse（BALB/cSlc-nu/nu、6wks）の左右両背部の皮下に3×106個ずつ接種したXenograftモデルを作成し、Sulforaphane(5μmol/day/mouse、以下SFNとする)の経口投与中における腫瘍体積変化を経時的に評価すると同時に、皮下から採取した腫瘍を組織学的に検討した。両肝癌細胞にて細胞株接種後5週目の腫瘍体積が対照群に比べてSulforaphane投与群では半減していた。腫瘍内のNrf2の標的遺伝子（HO-1、MRP2、NQO1）のmRNA発現をrealtime PCR法を用いて測定するとSFN投与群で上昇していた。細胞周期マーカーの検討からはSFN投与群ではCyclinD1、CDK2の発現が抑制されており、G1arrestが起こっている可能性が示唆された。また免疫組織学的な検討により、SFN投与群ではKi67陽性細胞数が対照群と比較して有意に減少しており、Cleaved Caspase3陽性細胞数が増加していたことから、腫瘍細胞の増殖抑制とアポトーシスの亢進が確認された。さらに腫瘍の増大には血管新生が大きな役割を果たしているので、血管新生の重要な蛋白であるCD34を免疫染色にて評価すると、いずれの細胞においてもコントロール群と比較しSFN投与群で陽性領域の減少を認めた。定量するとSFN投与群で有意に抑制していた。以上まとめると、in vivoにおいてSFN投与によりヒト肝癌細胞株の増殖は有意に抑制しており、アポトーシスの亢進も示唆された。さらに腫瘍内部の血管新生も抑制されていた。中断再開後は、メカニズムの解明のためin vitroの実験を進めていく予定である。

In vivo, 3×106 cells were inoculated subcutaneously on the left and right dorsal sides of nude mice (BALB/cSlc-nu/nu, 6wks) of hepatoma cell lines (HepG2, Huh-7). The tumor volume was changed during oral administration of Sulforaphane(5μmol/day/mouse, SFN). 5 weeks after inoculation, the tumor volume decreased by half compared with that of Sulforaphane. mRNA expression of Nrf2 target genes (HO-1, MRP2, NQO1) in tumors was determined by real-time PCR. The possibility of cell cycle arrest was also demonstrated by the inhibition of CyclinD1 and CDK2 expression by SFN. Immunohistologic examination showed that the number of Ki-67 positive cells decreased significantly in comparison with SFN group, and the number of Cleaved Caspase-3 positive cells increased significantly in comparison with SFN group. In addition, the increase of tumor size and angiogenesis, as well as the decrease of CD34 protein expression in the tumor cells, were also observed. The amount of SFN is intentionally suppressed. In vivo, SFN was used to inhibit the proliferation of hepatoma cell lines. The angiogenesis inside the tumor was inhibited by the tumor inhibitor. After the interruption, it will be opened again.

项目成果

Sulforaphane Inhibits Liver Cancer Cell Growth and Angiogenesis

• DOI: 10.21767/2254-6081.100189
• 发表时间: 2018
• 期刊: Archives in Cancer Research
• 作者: Shinya Sato;K. Moriya;Masanori Furukawa;Soichiro Saikawa;T. Namisaki;Mitsuteru Kitade;H. Kawaratani;K. Kaji;Hiroaki Takaya;Naotaka Shimozato;Yasuhiko Sawada;K. Seki;K. Kitagawa;Takemi Akahane;A. Mitoro;Yasushi Okura;H. Yoshiji;J. Yamao

Pharmacological activator of NRF2 inhibits hepatic cancer cell growth with attenuating angiogenesis

NRF2 的药理学激活剂通过减弱血管生成抑制肝癌细胞生长

• 发表时间: 2018
• 作者: Shinya Sato;et al.
• 通讯作者: et al.