Application of proteomic analysis to newborn screening for primary immunodeficiency

蛋白质组学分析在新生儿原发性免疫缺陷筛查中的应用

• 批准号: 19K17328
• 负责人: 柴田 洋史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-12-19 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K17328/
• 关键词: 新生児マススクリーニング; プロテオミクス; 原発性免疫不全症; 早期診断法; 新規疾患マーカー検索; 新生児スクリーニング; 質量分析; 家族性血球貪食性リンパ組織球症; ろ紙血; マススクリーニング; プロテオーム解析

2019年度には、京都大学医の倫理委員会に承認を得た研究計画書に従い、関連研究機関の保存検体や、自治体で新生児代謝スクリーニングに使用され保存されてあったろ紙血の収集を行い、原発性免疫不全症候群（PID）患者から採取したろ紙血32検体（新生児期検体5検体を含む）と健常コントロールろ紙血37検体（うち健常新生児期検体20検体）を解析候補検体として確保し得た。またろ紙血による質量分析の前処理として、ろ紙血中の可溶分画に豊富に含まれる蛋白を除去し膜蛋白を含む不溶分画を濃縮することで、免疫不全症の原因となるタンパク質の検出感度を大幅に上昇させる事ができた。このデータを元に、いくつかの内部標準蛋白の候補を設定し、家族性血球貪食性リンパ組織球症3型（FHL3)患者からのろ紙血9検体（発症時5検体、新生児期検体 4検体）と健常新生児検体10検体で疾患責任蛋白と内部標準蛋白の質量分析による発現評価を行ったところ、採取時期を問わず患者検体でのみ疾患責任蛋白の明らかな発現低下を認めた。FHL3患者の新生児期検体4検体では最大保存期間4年の検体もあったが、保存期間を問わず内部標準蛋白の発現量は健常新生児検体と同等であった。以上より、新生児期より質量分析によるFHL3疾患責任蛋白のろ紙血中での発現解析を用いて疾患スクリーニングが可能であることと、保存ろ紙血を用いても疾患スクリーニング解析が可能であることが示唆された。FHL3以外の免疫不全症に関しても適切な内部標準蛋白を選定し、精度・感度を向上させつつデータを集積していく方針としている。尚、上記成果に関しては第35回組織球症学会（Histiocyte society）にて報告し、ポスター賞であるArceci Prizeを受賞した。

In 2019, the Board of Medical Sciences of Kyoto University recognized that they had obtained research and design programs, medical research institutions to save the body, and new students of autonomous bodies to save the blood collection by using the equipment to save the blood collection. In patients with primary immune insufficiency syndrome (PID), blood samples were collected from patients with primary immune insufficiency syndrome (PID). Blood samples were collected from patients with primary immune insufficiency syndrome (PID). The cause of immune insufficiency, the cause of immune deficiency, the cause of immune insufficiency, and the cause of immune insufficiency. Analysis of the levels of internal standard protein in healthy newborns, normal 10-year-old, healthy newborns, healthy newborns, healthy newborns The serum albumin levels of the patients with chronic disease were significantly lower than those of the patients with chronic disease. The maximum retention period of 4-year body weight in FHL3 patients was 4-year-old, and the maximum retention period was 4 years. The internal standard protein levels of healthy newborns were similar. Quantitative analysis of FHL3 disease protein in blood was performed during the period of birth and postnatal period. it is possible to use the disease to show that it is possible to save the blood and save the blood. In addition to FHL3, the internal standard protein of immune insufficiency was selected, and the sensitivity of accuracy was determined. The 35th report of the Society of Glomerulopathy (Histiocyte society) has been successfully received by the Association of Glomerulopathy (Histiocyte society).

项目成果

The feasibility of newborn mass screening for primary hemophagocytic lymphohistiocytosis using Dried Blood Spot (DBS) proteomics.

使用干血斑（DBS）蛋白质组学对新生儿原发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症进行大规模筛查的可行性。

• 发表时间: 2019
• 作者: Ogawa Tomohiro;Takahashi Kazuki;Nagarkar Sanjog S.;Ohara Koji;Hong You-lee;Nishiyama Yusuke;Horike Satoshi;松田孟留，相馬輔;Tasuku Soma;相馬輔;相馬輔;櫻井悠人;新井智仁;Hirofumi Shibata
• 通讯作者: Hirofumi Shibata