Enhancement of hen and chick mucosal barrier function focused on oviductal microbiota.

增强母鸡和小鸡粘膜屏障功能的重点是输卵管微生物群。

基本信息

批准号：
21K14960
负责人：
新居隆浩
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は母鶏への有用細菌の経口投与によって母鶏卵管粘膜とヒナ腸管粘膜のバリア機能が強化されるか検証し、そのメカニズムを明らかにすることを目的としている。R3年度には産卵鶏への乳酸菌の経口投与は卵管粘膜の抗菌ペプチドのトリβディフェンシン（AvBD）10とタイト結合関連分子の claudin (CLA) 1の発現量を高めることで粘膜バリア機能を向上させる可能性を示した。R4年度は卵管粘膜におけるバリア機能増強のメカニズムを明らかにすることを目的とした。まず初めに、R3年度の研究で得た卵管の細菌叢と粘膜バリア関連因子の遺伝子発現の結果の相関解析と卵管粘膜スワブサンプル中の短鎖脂肪酸分析をした。その結果、卵管のAvBDsの遺伝子発現と酪酸やギ酸といった短鎖脂肪酸の合成能を有するCoprococcus属との間に有意な正の相関が認められた。また、乳酸菌の経口投与によって卵管子宮部粘膜でギ酸の濃度が上昇する可能性が示唆された。続いて、ギ酸や酪酸などの脂肪酸が卵管粘膜のバリア機能に作用するのかを卵管粘膜細胞を用いて調べた。約350日齢の白色レグホン産卵鶏から卵管膣部を採取し、初代卵管膣部上皮細胞をTCM-199培地中に播種した。播種の２４時間後にギ酸、酢酸、酪酸、乳酸で刺激し、７２時間後に培養細胞中のAvBDsとの遺伝子発現量を解析した。その結果、ギ酸および乳酸刺激でAvBD10が、酪酸および乳酸刺激でAvBD12の発現量がそれぞれ増加した。一方で、ギ酸、酪酸および乳酸刺激によりCLA-1やCLA-3の発現量が増加した。以上のことから、産卵鶏への乳酸菌の経口投与は卵管の細菌叢を変化させ、卵管で増加したCoprococcus属菌が卵管粘膜のギ酸産生を増加させることで、これが卵管粘膜のAvBD10やCLA-1の発現を増加させ、卵管粘膜のバリア機能を強化する可能性が示唆された。

这项研究旨在验证对母鸡的口服给药是否可以增强母鸡的输卵管粘膜和肠粘膜的屏障功能，并阐明该机制。 2013年，口服乳酸细菌以产卵母鸡的口服表明，通过增加输卵管粘膜的输卵管β-芬辛蛋白（AVBD）的抗菌肽的表达水平，并可以提高与紧密的结合分子claudin（cla）1，它可以改善Mucosal barrybarsosal barrile barlier barriel sirile nir MiCosal barriel nir MiCosal barriel nir MiCosal功能。 R4的目的是阐明输卵管粘膜增强屏障功能的机制。首先，我们对R3研究中获得的输卵管菌群的基因表达和与粘膜屏障相关的因子进行了相关分析，并分析了粘膜样品中的短链脂肪酸。结果，在输卵管中AVBD的基因表达与cocrococcus属之间观察到了显着的正相关，后者具有合成短链脂肪酸（如丁酸酸和甲酸）的能力。还已经提出，口服乳酸菌可能会增加输卵管子宫粘膜中甲酸的浓度。接下来，我们研究了使用输卵管粘膜粘膜细胞对输卵管粘膜的屏障功能进行了脂肪酸（例如甲酸和丁酸）的作用。从大约350天大的白色Leghon产卵母鸡中收集了输卵管阴道，然后将原发性输卵管上皮细胞播种在TCM-199培养基中。用甲酸，乙酸，丁酸和乳酸在播种后24小时刺激细胞，播种后72小时，分析了培养细胞中AVBD的基因表达水平。结果，AVBD10的表达水平随甲酸和乳酸刺激而增加，而AVBD12分别随丁酸和乳酸刺激而增加。另一方面，甲酸，丁酸和乳酸刺激增加了CLA-1和CLA-3的表达水平。从上面的角度来看，已经提出，乳酸细菌的口服给产卵鸡肉的口服改变了输卵管的植物群，并增加了输卵管中的细菌细菌在输卵管中增加了甲酸在输卵管中的产生，从而增加了avbd10和cla-1在Fallopian Tube mucosa和Fallopian Mucosa和Fallopian Mucosa和Fallopian Mucosa和Fallopian Themance Mucosa和Fallopian Themance Mucosa，并增强Mucosa和Mucosa的功能。