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ネコiPS細胞による新たな2型糖尿病治療法の開発

利用猫 iPS 细胞开发新型 2 型糖尿病治疗方法

基本信息

批准号：
21K14974
负责人：
金城綾二
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Osaka Metropolitan University (2022)Osaka Prefecture University (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K14974/
关键词：
ネコ iPS細胞 bFGF LIF 培養条件再生医療 2型糖尿病

项目摘要

申請者はこれまでの研究において、ヒトやイヌにおけるiPS細胞の培養条件を参考とし、ネコiPS細胞の作製時に様々な培地、添加因子、細胞外基質を組み合わせ、ネコiPS細胞の作製を試みた。その結果、高い分化能と増殖能を有するネコiPS細胞が作製可能な培養条件を明らかにした。本手法で作製したネコiPS細胞は未分化マーカー(OCT, NANOGなど)を発現し、継続的な培養を行うことが可能であった。さらにin vitroで様々な細胞に分化することが可能であった。一方、本細胞の作製時には他種の細胞と共培養する手法（共培養系）を採用している。共培養系はiPS細胞の培養・維持に必要な様々な成長因子や細胞外基質の分泌、細胞間接着シグナルの発生などの多くの利点があり、iPS細胞の培養時に多く使用されてきた。一方、iPS細胞の分化誘導を行う際には、細胞分化には不要な成長因子や細胞外基質の分泌、細胞間接着シグナルの発生が生じてしまう。その結果、不十分な分化誘導や意図しない細胞種への分化誘導が生じるなどの欠点が考えられる。そこで、本年度は他種の細胞との共培養を必要としない、ネコiPS細胞の培養条件について検討を行った。その結果、培地や添加因子に改良を加えることにより、共培養系で作製したネコiPS細胞であっても、ネコiPS単独での維持が可能な培養条件を導き出すことに成功した。今後、本培養条件を活用することにより、不確定な要素を除外した条件下において、ネコiPS細胞の膵島細胞への分化誘導について検討することが可能となったと考える。

The applicant responded to this study by providing information on the culture conditions of iPS cells, and by preparing iPS cells, adding factors, and assembling extracellular matrix, and preparing iPS cells. The results, high differentiation ability and proliferation ability of iPS cells were analyzed. This method is used to control the development of undifferentiated iPS cells (OCT, NANOG), and the development of undifferentiated iPS cells. In vitro, cell differentiation is possible. The method of co-culture of cells of other species (co-culture system) shall be adopted during the production of one or more cells. The co-culture system has many advantages for the culture and maintenance of iPS cells, such as the secretion of growth factors, extracellular matrix, and the development of cell-to-cell interface, and the use of growth factors in the culture of iPS cells. In one aspect, the differentiation of iPS cells is induced by growth factors, extracellular matrix secretion and intercellular adhesion. The results showed that the differentiation induction of cell species was not very significant. This year, we will discuss the culture conditions of iPS cells. The results showed that the co-culture system could be successfully developed by adding culture factors and maintaining culture conditions independently. In the future, this culture condition can be used to induce differentiation of iPS cells except for uncertain factors.