転移性大腸癌に対する癌免疫療法の有効性からみる免疫細胞浸潤機構の解明

基于癌症免疫疗法对转移性结直肠癌的有效性阐明免疫细胞浸润机制

基本信息

批准号：
21K15533
负责人：
弓削亮
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15533/
关键词：
免疫チェックポイント間質大腸癌免疫細胞浸潤大腸がん

项目摘要

本研究では、CAFを標的としたPDGFR阻害剤の併用が抗PD-1抗体による癌免疫療法の感受性を上げるという仮説の元、腫瘍免疫における3つの組織学的phenotypeを再現した同系免疫応答大腸癌肝転移マウスモデルを作製し、以下の検討を行うことで、本併用療法の有効性の立証及び、免疫細胞浸潤機構の解明を目指す予定とした。［1］原発巣と肝転移巣の間質量に着目したヒト大腸癌外科切除標本の免疫組織学的解析［2］CAFの単離及び組織学的phenotype別の肝転移を再現したマウスモデルの作成［3］上記の肝転移モデルに対する抗PD-1抗体及びPDGFR阻害剤による転移抑制効果の検証［4］腫瘍微小環境の変化を多面的に解析し併用療法の有効性及び免疫細胞浸潤機構を検証。今年度は主に［4］についての解析を進めた。抗PD-1抗体単剤群の両群の肝転移腫瘍からそれぞれRNAを抽出し、RNAseq解析及びGSEA解析を行ったところ、併用群においてPDGFR軸を含む複数の間質形成に関連する経路が抑制され、T細胞、B細胞、サイトカイン関連などの腫瘍免疫に関わる複数の経路が活性化されていた。また、肝転移巣から単細胞浮遊液を作成し、腫瘍内のCD8及びCD4陽性T細胞の活性化をフローサイトメトリーで解析したところ、併用群においてCD62L陰性でCD44陽性、CD69 陽性の活性化CD8及びCD4陽性T細胞の割合がそれぞれ有意に増加していた。

基于以下假设：将CAF靶向的PDGFR抑制剂结合通过抗PD-1抗体提高了对癌症免疫疗法的敏感性，我们创建了一种合成性免疫反应结肠癌肝转移的小鼠模型，该模型在肿瘤免疫和旨在阐明疗法的机制中，旨在阐明疗法的机制，并阐明了拟定的疗法，从而阐明了对象征性的机制，从而阐明了拟定的疗法。调查。 [1]对人类结肠癌手术切除的免疫组织学分析，重点是焦点和肝转移的间隙[2] CAF的分离和创建小鼠模型，该模型通过组织学表型复制肝转移[3] [3]转移剂对转移的抗体抗体和pD抗体抑制作用的验证转移模型[4]对肿瘤微环境变化的多方面分析，并验证联合疗法的有效性和免疫细胞浸润的机理。今年，我们主要对[4]进行了分析。在两组抗PD-1抗体单药组中，从肝转移肿瘤中提取RNA，并进行了RNASEQ和GSEA分析。在组合组中，抑制了与基质形成有关的多种途径，包括PDGFR轴，并激活与肿瘤免疫相关的多种途径，例如T细胞，B细胞和细胞因子相关。此外，从肝转移灶制备了单细胞悬浮液，并通过流式细胞仪分析了肿瘤中CD8和CD4阳性T细胞的激活。在联合组中，CD62L阴性CD44阳性和CD69阳性活化的CD8和CD4阳性T细胞的比例显着增加。