血中循環腫瘍細胞を用いた大腸癌遠隔転移を規定する遺伝子群の同定

利用循环肿瘤细胞鉴定调节结直肠癌远处转移的基因

• 批准号: 21K15916
• 负责人: 石橋 嶺
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15916/
• 关键词: 循環腫瘍細胞

オンコパネルを用いた遺伝子解析に基づく薬剤決定に見られるように、癌の診療は癌細胞内の遺伝子変異・発現情報に基づく診療に急速にシフトしつつある。したがって、今後、簡便に、頻回に、癌細胞の遺伝子情報を取得する方法が必須となると考えられる。血中循環腫瘍細胞（circulating tumor cell）の捕捉はその手法のひとつであるが、申請者は数年来、簡便なポリマー樹脂CTCチップを応用し、閉塞性大腸癌に対する内視鏡的金属ステント留置術の前後でのCTC数の変化を中心に検討しつつCTCの確実な捕捉法を樹立してきた。本申請では、CTCの捕捉だけでなく その遺伝子解析研究を進め、大腸癌患者を対象に捕捉したCTCのホットスポットの遺伝子変異の半網羅的解析とRNA発現状況の半網羅的解析を行って、それらと臨床情報とを統合して解析することで真に遠隔転移惹起と相関する遺伝子変異・発現遺伝子セットを同定する。そのうえで、転移ドライバー分子を絞り込み、機能解析を加えて大腸癌遠隔転移責任分子を同定する。本年度は、これまでの論文研究でも使用してきた癌の特異的表面マーカーに対する抗体によるCTC 捕捉原理を応用した簡便なマイクロ流体デバイス「樹脂 CTC チップ」を用いてヒト大腸癌患者の血清からCTCを捕捉する。その後の遺伝子解析を円滑にすすめるために、CTCチップに供する前にCD45磁気ビーズを用いて白血球をあらかじめ除去した。2) 一連の操作で回収されたCTCをもとにRNAシークエンスを行い、臨床病態、特に遠隔転移の出現との関連性を検討する。その結果、血行性転移に関わる可能性の高い遺伝子セット、あるいはLgr5のような単一遺伝子、あるいは遺伝子変異を抽出し検討中である。

在基于遗传分析的药物确定中可以看出，使用Onco-actanels的遗传分析，癌症治疗基于癌细胞中的遗传突变和表达信息，迅速转移到医疗治疗。因此，人们认为将来，获得一种简单且经常获得癌细胞遗传信息的方法将成为必不可少的。其中一种方法是捕获血液中的循环肿瘤细胞，几年来，申请人一直在建立一种可靠的捕获CTC的方法，重点是内窥镜金属支架前后的CTC计数变化，用于阻塞性结肠癌。在此应用中，我们不仅将对CTC进行遗传分析，还将进行遗传分析，对在结肠癌患者中捕获的CTC热点中的基因突变进行半竭力分析，并分析它们和临床信息以识别一组基因突变和表达基因，这些基因与远处转移真正相关。然后，将转移驱动器分子缩小范围，并应用功能分析以识别远处的转移责任分子。今年，我们将使用一种称为“树脂CTC芯片”的简单微流体设备从人类结肠癌患者的血清中捕获CTC，该设备使用抗体对特定的癌症表面标志物的CTC原理，该原理已在先前的研究中使用。为了促进随后的遗传分析，在应用于CTC芯片之前，使用CD45磁珠预先驱动白细胞。 2）基于在一系列程序中回收的CTC进行RNA序列，以检查临床病理学之间的关联，尤其是远处转移的出现。结果，我们目前正在提取和检查一组可能参与血源转移，单个基因（例如LGR5）或遗传突变的基因。

项目成果

Mutant KRAS drives metabolic reprogramming and autophagic flux in premalignant pancreatic cells.

• DOI: 10.1038/s41417-021-00326-4
• 发表时间: 2022-05
• 期刊: CANCER GENE THERAPY
• 影响因子: 6.4
• 作者: Suzuki, Tatsunori;Kishikawa, Takahiro;Sato, Tatsuyuki;Takeda, Norihiko;Sugiura, Yuki;Seimiya, Takahiro;Sekiba, Kazuma;Ohno, Motoko;Iwata, Takuma;Ishibashi, Rei;Otsuka, Motoyuki;Koike, Kazuhiko
• 通讯作者: Koike, Kazuhiko