オルガノイドを用いた膵神経内分泌腫瘍の腫瘍免疫応答解明と新規治療薬の開発

利用类器官阐明肿瘤免疫反应并开发胰腺神经内分泌肿瘤新治疗剂

• 批准号: 21K15931
• 负责人: 長谷川 翔
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15931/
• 关键词: 神経内分泌腫瘍; 同所移植モデルマウス; オルガノイド; 膵神経内分泌腫瘍; マウス腫瘍同所移植モデル; 免疫解析; 腫瘍免疫; 同所移植モデル

本研究の目的は、オルガノイド技術を用いて、膵神経内分泌腫瘍における腫瘍免疫治療効果予測が可能な細胞株およびマウスモデルの樹立である。当該年度には、マウス膵頭細胞の培養を継続して行った。手術によりマウス生体からの膵臓を切離し膵頭採取、単離培養は可能であったが、1週間を超える長期の培養は困難であった。現在様々な培養条件を試みており、今後も継続する予定である。また遺伝子改変に用いるプラスミド（Menin CRISPR プラスミド）が機能しているか、実験中である。長期培養困難である膵島細胞では現状行えないので、膵癌オルガノイド細胞に対して行っている。当該年度には、使用しているCIRSPRプラスミドのターゲット配列が、使用するマウス内にあることをデータベースから確認した。その前後の配列から、PCR用のプライマーを設計した。プライマーを用いて、目的のマウス膵癌オルガノイド細胞のDNAにPCRを行い、目的配列の増幅を行った。増幅した配列にサンガ―シークエンスを行い、プラスミドのターゲット配列が含まれていることを確認できた。現在は、遺伝子改変継続中であるが、本研究がうまくいけば、プラスミドが機能することが確認できる。よって、膵島の生存中に遺伝子改変を行うことが出来る可能性がある。膵島の遺伝子改変ができれば、マウス由来の細胞株の樹立ができ、同所移植モデルへの応用が期待できる。同所移植モデルが可能となれば、免疫解析を行うことができる可能性がある。

は の purpose, this study オ ル ガ ノ イ を ド technology with い て Cui 経 endocrine god, swollen sores に お け る swollen sores immunotherapy unseen fruit may be が な cell lines お よ び マ ウ ス モ デ ル の set で あ る. In that year, に ウス膵 and ウス膵 head cells are <s:1> cultured for を継続 て て rows った. Surgery に よ り マ ウ ス raw body か ら の Cui viscera を sundering し Cui head take, 単 cultivate は possible で あ っ た が, 1 week between を え る の cultivate long-term は difficult で あ っ た. Now, the 々な cultivation conditions are を and みてお みてお, and in the future, を 継続する will be determined である. ま た heritage 伝 child change - に with い る プ ラ ス ミ ド (Menin CRISPR プ ラ ス ミ ド) が function し て い る か, be in 験 で あ る. Long-term training difficult で あ る Cui islet cell で は status line え な い の で, Cui carcinoma オ ル ガ ノ イ ド cells に し seaborne て line っ て い る. When the annual に は, use し て い る CIRSPR プ ラ ス ミ ド の タ ー ゲ ッ ト column が, use す る マ ウ ス within に あ る こ と を デ ー タ ベ ー ス か ら confirm し た. The sequence of そ そ and the sequence before and after そ ら, and the PCR is designed with <s:1> プラ プラ and ら を を を を を を た. プ ラ イ マ ー を with い て, purpose の マ ウ ス Cui carcinoma オ ル ガ ノ イ ド cell line の に DNA PCR を い, purpose with column の raised line of を っ た. Rights of し た match column に サ ン ガ - シ ー ク エ ン ス を い, プ ラ ス ミ ド の タ ー ゲ ッ ト match column が containing ま れ て い る こ と を confirm で き た. は, but 伝 change now - 継 続 in で あ る が, this study が う ま く い け ば, プ ラ ス ミ ド が function す る こ と が confirm で き る. よ っ て, Cui の survival in に heritage 伝 child change - line を う こ と が possibility out る が あ る. の Cui island heritage 伝 child change - が で き れ ば, マ ウ ス origin の cell lines の set が で き, with transplant モ デ ル へ の 応 with が expect で き る. The same transplantation モデ が が が may となれば, and immunoassay を line う とがで とがで る る may がある.

项目成果

膵・消化管内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種療法（PRRT）の腫瘍縮小に寄与する因子は何か

哪些因素有助于肽受体放射性核素疗法（PRRT）治疗胰腺和胃肠道内分泌肿瘤的肿瘤缩小？

• 发表时间: 2022
• 作者: 玉井 龍成;米田 頼晃;印牧 奨真;樫田 博史;工藤 正俊;半田 久志;米田頼晃 半田久志 工藤正俊;長谷川翔
• 通讯作者: 長谷川翔