頭部血管肉腫患者の血漿におけるメタボロミクス解析と腫瘍増殖機序の解明

头部血管肉瘤患者血浆的代谢组学分析及肿瘤生长机制的阐明

• 批准号: 21K16212
• 负责人: 神保 晴紀
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16212/
• 关键词: 血管肉腫; メタボロミクス; メタボロミクス解析; 増殖機序

本研究では、①頭部血管肉腫患者の血漿検体のメタボロミクスを行い、同腫瘍の無い健常者の血漿検体と比較し、有意に変化している低分子代謝物があるのかどうか、② in vitro でその低分子代謝物が腫瘍増殖に直接関与しているのかどうかを解明すること、③ in vivo でそれが治療標的と成り得るかを検証し最終的には新規薬剤の発見につなげることを目的とする。また、④腫瘍増殖に直接関与していない代謝物も含めてバイオマーカーに成り得る代謝物が存在するのかどうかについても併せて探索する。2022年度の成果として、①に関しては健常者の血漿検体の採取が完了し、患者群とのメタボロミクス結果が得られ、解析を進めている段階である。②に関しては予備実験で着目した低分子代謝産物を産生する酵素の阻害剤の存在下では、ヒト血管肉腫細胞株(ISO-HAS-B, MO-LAS-B)、マウス類上皮血管内皮腫(EOMA)の増殖が有意に抑制されることをColony formation assayやWST-8 assayを用いて示し、それが同低分子代謝物を添加することで、抑制が解除されることを示した。増殖が抑制される機序を解明する目的で、前述の酵素阻害剤の存在下においてマイクロアレイでmRNA発現の変化を網羅的に解析することを検討している。③に関しては、まずは血管肉腫のマウスモデルを免疫不全の無いマウスにおいて確立させるべく、マウス血管肉腫細胞株を皮下接種だけでなく腹腔内接種も行って検討しており、生着率の良い条件が探索している。

This study was conducted to: ① compare plasma profiles of patients with vascular edema of the head, compare plasma profiles of healthy subjects with vascular edema of the head, intentionally change low molecular weight metabolites, ② clarify the direct relationship between low molecular weight metabolites in vitro and tumor growth 3. In vivo, the target of treatment is identified and the final target is identified. Metabolite content is directly related to tumor growth, and the existence of metabolites is explored. The results of 2022 are as follows: (1) the collection of plasma samples from healthy patients is completed,(2) the results of patient groups are obtained, and (3) the analysis is advanced. (2) In the presence of inhibitors of enzymes that inhibit the production of low-molecular-weight metabolites, the proliferation of vascular sarcoma cell lines (ISO-HAS-B, MO-LAS-B) and epithelial vascular endothelioma (EOMA) is intentionally inhibited by the use of Colony formation assay and WST-8 assay. To clarify the mechanism of gene expression inhibition, the analysis of gene expression and gene expression in the presence of the enzyme inhibitor is discussed. 3. To explore the optimal conditions for the growth rate of vascular sarcoma cells by intraperitoneal inoculation.