Therapeutic Application of CRISPR-Cas3 for dominant dystrophic Epidermolysis Bullosa

CRISPR-Cas3在显性营养不良性大疱性表皮松解症中的治疗应用

• 批准号: 21K16230
• 负责人: 森坂 広行
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka University (2022)Kochi University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16230/
• 关键词: 表皮水疱症; CRISPR; Cas3; 遺伝子編集; 遺伝子治療; ドミナントネガティブ; VII型コラーゲン

昨年度は顕性栄養障害型表皮水疱症(Dominant Dystrophic Epidermolysis Bullosa: DDEB)の細胞モデル作成の為に、CRISPR-Cas9タンパクを用いて、不死化ヒト角化細胞に遺伝子編集を行った。昨年度は2クローン得られており、それぞれDDEB、潜性遺伝型栄養障害型表皮水疱症（Recessive Dystrophic Epidemolysis Bullosa: RDEB)の特徴を示していた。すなわち、DDEBモデルでは蛍光免疫染色、ウエスタンブロットでVII型コラーゲンタンパク発現が見られ、RDEBモデルでは同タンパク発現が見られなかった。CRISPR-Cas3を用いた遺伝子治療においては様々な遺伝子変異のパターンに対応する必要があり、Cas9を用いてさらに複数のクローンを作出した。合計22クローンとなり、missense変異、nonsense変異、frame-shift変異など様々なパターンの組合せのクローンが得られた。

Yesterday annual は 顕 sex tech students.their ownship type a handicap of skin blister disease (Dominant Dystrophic Epidermolysis Bullosa: DDEB) の cells モ デ ル の に, consummate CRISPR - Cas9 タ ン パ ク を with い て, undead ヒ ト keratinocytes に heritage 伝 compiling を child line っ た. Yesterday annual は 2 ク ロ ー ン have ら れ て お り, そ れ ぞ れ DDEB, traces of latent type 伝 tech students.their ownship type a handicap of skin blister disease (Recessive Dystrophic Epidemolysis Bullosa: RDEB) の, 徴 を shown し て い た. す な わ ち, DDEB モ デ ル で は 蛍 immune dyeing, light ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト で type VII コ ラ ー ゲ ン タ ン パ ク 発 が now see ら れ, RDEB モ デ ル で は with タ ン パ ク 発 が now see ら れ な か っ た. Traces of CRISPR - Cas3 を with い た 伝 son treatment に お い て は others 々 な heritage 伝 sub - different の パ タ ー ン に 応 seaborne す る necessary が あ り, Cas9 を with い て さ ら に plural の ク ロ ー ン を make し た. Total 22 ク ロ ー ン と な り, missense - vision, nonsense - different, the frame - shift - different な ど others 々 な パ タ ー ン の combination せ の ク ロ ー ン が must ら れ た.

项目成果

優性型栄養障害型表皮水疱症へのCRISPR-Cas3の治療応用

CRISPR-Cas3在显性营养不良性大疱性表皮松解症中的治疗应用

• 发表时间: 2022
• 作者: Teruasa Murata;Tetsuya Honda;Alshimaa Mostafa;Kenji Kabashima;村田 光麻;村田 光麻;森坂 広行
• 通讯作者: 森坂 広行