MPN発症のカギを握る巨核球：患者骨髄環境における腫瘍性巨核球の働きとは？

骨髄増殖性腫瘍 (MPN) は、造血幹細胞にドライバー遺伝子変異が生じた結果、末梢血中の特定の血球の異常な増加や、骨髄の線維化が生じる造血器腫瘍である。患者骨髄では、血小板の前駆細胞である成熟巨核球の著しい増加や形態異常が観察されることから、ドライバー遺伝子変異を獲得した造血幹細胞が分化することで産生された腫瘍性巨核球がサイトカインやエクソソームの産生を介してMPNの病態形成に関与していると考えられている。本研究では、こうした腫瘍性巨核球が、骨髄増殖性腫瘍 (MPN) の発症において果たす役割を解明することを目的としており、これまでにMPN患者骨髄から単離した成熟巨核球についてRNA-seq解析を実施した。今年度は、RNA-seq解析によって同定された、MPN患者由来の成熟巨核球に特異的に発現する遺伝子（MPN発現遺伝子）について、MPN発症との関連を解析した。まずRT-qPCR法によりMPN患者由来の巨核球においてこれらの遺伝子が発現していることを確認した。次に、MPN患者末梢血から単離したCD34陽性造血幹細胞を培地中で分化誘導した結果、分化した巨核球においてMPN発現遺伝子の発現を検出した。そこで、同様の造血幹細胞におけるMPN発現遺伝子の発現をRNA干渉法により抑制し、上記in vitro分化誘導モデルを用いて巨核球分化への影響を評価した。さらに、MPN発症モデルマウスから血小板を採取し、MPN発現遺伝子についてRT-qPCR法により発現量を解析した。

骨髄増殖性腫瘍 (MPN) は、造血幹細胞にドライバー遺伝子変異が生じた結果、末梢血中の特定の血球の異常な増加や、骨髄の線維化が生じる造血器腫瘍である。患者骨髄では、血小板の前駆細胞である成熟巨核球の著しい増加や形態異常が観察されることから、ドライバー遺伝子変異を獲得した造血幹細胞が分化することで産生された腫瘍性巨核球がサイトカインやエクソソームの産生を介してMPNの病態形成に関与していると考えられている。本研究では、こうした腫瘍性巨核球が、骨髄増殖性腫瘍 (MPN) の発症において果たす役割を解明することを目的としており、これまでにMPN患者骨髄から単離した成熟巨核球についてRNA-seq解析を実施した。今年度は、RNA-seq解析によって同定された、MPN患者由来の成熟巨核球に特異的に発現する遺伝子（MPN発現遺伝子）について、MPN発症との関連を解析した。まずRT-qPCR法によりMPN患者由来の巨核球においてこれらの遺伝子が発現していることを確認した。次に、MPN患者末梢血から単離したCD34陽性造血幹細胞を培地中で分化誘導した結果、分化した巨核球においてMPN発現遺伝子の発現を検出した。そこで、同様の造血幹細胞におけるMPN発現遺伝子の発現をRNA干渉法により抑制し、上記in vitro分化誘導モデルを用いて巨核球分化への影響を評価した。さらに、MPN発症モデルマウスから血小板を採取し、MPN発現遺伝子についてRT-qPCR法により発現量を解析した。