Crosstalk between GATA3+ regulatory T cells and renal resident cells in crescentic glomerulonephritis

新月体肾小球肾炎中 GATA3 调节性 T 细胞与肾常驻细胞之间的串扰

• 批准号: 21K16291
• 负责人: 酒井 亮太
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16291/
• 关键词: 半月体形成性糸球体腎炎; 組織制御性T細胞; GATA3; IL-33; IL-2; TCR; 制御性T細胞; LacZ; 腎炎; 足細胞; 血管内皮細胞; 線維芽細胞

腎炎回復期に出現するGATA3陽性組織制御性T細胞(Treg)の特徴の把握するために蛍光試薬SPiDER-βGal(株式会社同仁化学研究所)を用いて、1細胞レベルでの解析を目指した。しかし、フローサイトメトリー解析ではConventional T細胞でGATA3陽性のうち、β-galactosidase陽性細胞は約60%に、さらにGATA3陽性Tregのうちβ-galactosidase陽性細胞は約10-20%にとどまった。また組織解析でも自家蛍光との区別が困難で、明確にGATA3陽性Tregを区別できないと判断した。従って、GATA3陽性Tregのbulkもしくはsingle cell RNA-seq解析は施行できなかった。このため、まずin vitroでのGATA3陽性Tregの誘導を試みた。脾臓から単離したTregはCD3/CD28刺激なしでIL-2およびIL-33によりGATA3が強く発現することを明らかにした。Foxp3を発現しないConventional T細胞をIL-4およびIL-2のいわゆるTh2条件でTCR刺激をしたところ、TCR刺激を減らしていくと段階的にGATA3の発現は減少した一方で、TregにおいてはConventional T細胞の増殖に必要な程度のTCR刺激を加えたものは逆にGATA3の発現が抑制され、Foxp3を失ったexTregが増加した。しかし、TCR刺激を段階的に減らしていくとある程度の「強すぎないTCR刺激」ではexTregは増加せず、TCR刺激無しと比較してGATA3陽性Tregが増加することを明らかにした。腎固有細胞としてHatje FA, et al. J Am Soc Nephrol. 2021に従い、メサンギウム細胞、血管内皮細胞、足細胞のソーティングし、発現遺伝子についてRT-PCRで確認した。各々細胞培養が可能となった。

Nephritis reply period に appear す る GATA3 positive organizational system of the royal sex T cells (Treg) の 徴 の grasp す る た め に 蛍 light try 薬 spiders - beta Gal (colleagues, chemical research institute) を い て, 1 cell レ ベ ル で の parsing を refers し た. Youdaoplaceholder0 フロ サ サ トメトリ トメトリ フロ analysis of で and Conventional T cells で gata3-positive <s:1> うち, β -galactosidase-positive cells で approximately 60%に, さらに gata3-positive Treg うち うち, β -galactosidase-positive cells にと approximately 10-20%にと まった まった. ま た organization parsing で も their 蛍 light と の difference が difficulties で, clear に GATA3 positive Treg を difference で き な い と judgment し た. Youdaoplaceholder0, GATa3-positive Treg <s:1> bulk く く く single cell RNA-seq analysis performed で な な った った. <s:1> ため ため, まずin vitroで <s:1> GATa3-positive Treg <e:1> induced を test みた. Splenic か ら 単 from し た Treg は CD3 / CD28 stimulus な し で IL - 2 お よ び IL - 33 に よ り GATA3 が strong く 発 now す る こ と を Ming ら か に し た. Foxp3 を 発 now し な い but these T cells を IL - 4 お よ び IL - 2 の い わ ゆ る で Th2 conditions which stimulate を し た と こ ろ, which stimulate を minus ら し て い く と Duan Jie of に GATA3 の 発 は now reduce し た で, Treg に お い て は but T cells の に な degree necessary rights colonization の TCR stimulus を plus え た も の は inverse に GATA3 の 発 now が inhibit さ れ, Foxp3 を lost っ た exTreg が raised plus し た. し か し, which stimulate を Duan Jie に minus ら し て い く と あ る degree の "strong す ぎ な い TCR stimulus" で は exTreg は raised plus せ ず, which stimulate し と compare し て GATA3 positive Treg が raised plus す る こ と を Ming ら か に し た. Renal inherent cells と し て Hatje FA, et al. J Am Soc Nephrol 2021 に 従 い, メ サ ン ギ ウ ム cells, endothelial cells, foot の ソ ー テ ィ ン グ し, 発 now but 伝 に つ い て rt-pcr で confirm し た. Each 々 cell culture が may となった.

项目成果

Tissue resident GATA3+ regulatory T cells regulated by the IL-33-ST2 axis and amphiregulin play roles in the convalescence stage of crescentic glomerulonephritis.

受 IL-33-ST2 轴和双调蛋白调节的组织驻留 GATA3 调节性 T 细胞在新月体肾小球肾炎的恢复期发挥作用。

• 发表时间: 2021
• 作者: Ryota Sakai;Koichi Amano
• 通讯作者: Koichi Amano

AI(人工知能)で迫る、顔認識による膠原病疾患の新たな診断補助ツールの開発

利用AI（人工智能）进行面部识别，开发胶原蛋白疾病的新型诊断辅助工具

• 发表时间: 2023
• 作者: 4.酒井亮太;吉永正一;岡田悠介;柴田明子;倉沢隆彦;近藤恒夫;天野宏一
• 通讯作者: 天野宏一

Systematic review and meta-analysis for 2023 clinical practice guidelines of the Japan Research Committee of the Ministry of Health, Labour, and Welfare for Intractable Vasculitis for the management of ANCA-associated vasculitis

日本厚生劳动省难治性血管炎研究委员会 2023 年临床实践指南对 ANCA 相关血管炎管理的系统回顾和荟萃分析

• DOI: 10.1093/mr/roac114
• 发表时间: 2022
• 期刊: Modern Rheumatology
• 影响因子: 2.2
• 作者: Watanabe Ryu;Oshima Megumi;Nishioka Norihiro;Sada Ken-Ei;Nagasaka Kenji;Akiyama Mitsuhiro;Ando Taiki;Higuchi Tomoaki;Inoue Yoshino;Kida Takashi;Mutoh Tomoyuki;Nakabayashi Akihiko;Onishi Akira;Sakai Ryota;Waki Daisuke;Yamada Yosuke;Yajima Nobuyuki;Tamura N
• 通讯作者: Tamura N

ループス腎炎に対するシクロホスファミド・タクロリムス併用療法の有用性と安全性

环磷酰胺和他克莫司联合治疗狼疮性肾炎的有效性和安全性

• 发表时间: 2022
• 作者: 酒井亮太;柴田明子;岡田悠介;吉永正一;斎藤俊太郎;倉沢隆彦;近藤恒夫;天野宏一
• 通讯作者: 天野宏一

The survival factors of GATA3+ Tregs in the convalescence stage of glomerulonephritis

肾小球肾炎恢复期GATA3 Tregs的生存因素

• 发表时间: 2022
• 作者: Ryota Sakai;Mariko Toguchi;Koichi Amano
• 通讯作者: Koichi Amano