Preserensitization therapy for ABO incompatible organ transplantativation of post-vaccination immunity by selective blockade of B lymphocytes in deson

ABO血型不合器官移植的预致敏疗法通过选择性阻断B淋巴细胞来实现疫苗接种后免疫

基本信息

项目摘要

ABO血液型不適合臓器移植では、術前脱感作療法による抗血液型抗体産生細胞の抑制が不可欠であり、抗CD20モノクローナル抗体(リツキシマブ)を使用するプロトコールがスタンダードとなっている。しかし、リツキシマブによる非特異的なB細胞の抑制状態は術後も長期にわたって続くため、ワクチンによる免疫獲得能は著明に低下する。そこで、リツキシマブの代わりに抗CD1d抗体を用いて血液型抗体産生に関わるB細胞サブセットのみを特異的にブロックすることにより、抗血液型抗体の抑制を維持しつつワクチンによる免疫獲得能を保持できる可能性を探るのが本研究の目的である。抗CD1d抗体投与により血液型抗体産生を抑制し、かつワクチンの効果が保持されるという仮説を証明するため、以下のような検討を行う予定である。①抗体価測定系の確立(2023年度)野生型C57BL/6マウスにヒト赤血球と、仮想不活化ワクチンとして卵白アルブミン(OVA)を免疫し、抗血液型抗体、抗OVA抗体を測定する系を作成する。②抗CD1d抗体投与と抗体価測定、フェノタイプ解析(2023年度)C57BL/6マウスを3グループに分け、それぞれにIsotype control、抗CD20抗体(リツキシマブ)、抗CD1d抗体を投与(Day0)した後、ヒトA型赤血球とOVAで2回免疫を行う(Day1, Day8)。免疫後2週(Day22)、6週(Day50)で抗A抗体・抗OVA抗体の産生状況を確認する。末梢血中B細胞フェノタイプ解析も同時に行う。ワクチンとして、H-2Kb拘束性OVA由来の抗原ペプチドと免疫賦活剤とエマルジョン化し、C57BL/6マウスに腹腔免疫する。また、T-Select H-2Kb OVA Tetramer(TS-5001-1C)を用い、CD8陽性細胞中のTetramer陽性細胞率(%)を評価する。
ABO blood type is not suitable for organ transplantation, and the inhibition of anti-blood type antibody-producing cells in preoperative desensitization therapy is indispensable. Anti-CD20 anti-blood type antibody (anti-CD20 anti-CD20 anti Non-specific B cell suppression is a long-term, post-operative decline in immune function. The purpose of this study is to explore the possibility of maintaining the inhibition of anti-CD1d antibodies in the production of blood-type antibodies related to B cell serotype and specificity. Anti-CD1d antibody administration inhibits the production of blood type antibodies, and the effects of anti-CD1d antibody administration are maintained. (1) Establishment of antibody assay system (Year 2023) for wild-type C57BL/6, erythrocytes, and non-activated OVA; establishment of immune, anti-blood type antibody, and anti-OVA antibody assay system. Anti-CD1d antibody administration and antibody detection, analysis of C57BL/6 antibody (Year 2023), Isotype control, anti-CD20 antibody (Day0), anti-CD1d antibody administration (Day1, Day8) 2 weeks (Day22) and 6 weeks (Day50) after immunization to confirm the production of anti-A antibodies and anti-OVA antibodies. B cells in peripheral blood are analyzed simultaneously. C57BL/6 is an antigen derived from H-2Kb. T-Select H-2Kb Tetramer(TS-5001-1C) was used and the percentage of Tetramer-positive cells ( %) in CD8-positive cells was evaluated.

项目成果

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