膵癌予後予測遺伝子（E2F7）の新規血清腫瘍マーカーへの応用と機能解析

胰腺癌预后预测基因(E2F7)作为新型血清肿瘤标志物的应用及功能分析

• 批准号: 21K16488
• 负责人: 蘆田 良
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Shizuoka Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16488/
• 关键词: 膵癌; E2F7; PAC-signature; 予後予測遺伝子

令和4年度の研究実施計画では以下の3項目に関して実施予定であった。1. Tissue microarray (TMA)の免疫染色と予後との比較：腫瘍組織のE2F7発現状況をスコアリングし、予後や腫瘍進行度との関連を解析する。2. E2F7の機能解析： 1). in vitro実験：膵癌細胞株10種と1種類の正常膵管上皮細胞株を用いてE2F7mRNAの発現度を評価する。2). 高発現株に対するsiRNA法によるE2F7のノックダウンを行いE2F7の発現変化が、細胞株の増殖、遊走、浸潤能にどのような変化を与えるかを調べる。3. 担癌症例の血清検体におけるE2F7発現の定量：切除膵癌の別コホートを用いて、膵癌組織および対応する血清検体でのE2F7の発現量を調べる。その発現量の挙動が、既存の腫瘍マーカーと比較して有用なものであるかどうかを検討する。令和4年度に行った研究実績としては1．E2F7発現陽性が223例で発現陰性が53例であった。陽性例と陰性例で全生存期間に有意差は認めなかった（p=0.345）。また、陽性例と陰性例で無再発生存期間にも有意差は認めなかった（ｐ＝0.703）。E2F7の発現状況と術後補助化学療法の種類（S-1もしくはGEM）で予後解析を行った。E2F7発現陰性例ではS-1群とGEM群で全生存期間に有意差を認めなかった（ｐ＝0.162）。一方でE2F7発現陽性例ではS-1群がGEM群に比べて全生存期間が有意に良好であった（ｐ＝0.002）。2. E2F7の機能解析では、膵癌細胞株10種と1種類の正常膵管上皮細胞株のE2F7mRNA発現はCapan-1とTU-8902の膵癌細胞株で発現が亢進しており、これらにsiE2F7でノックダウンできたことを確認した。3. 血清検体の採取に関しては2．の解析が進んだ段階で開始予定である。

The research and implementation plan for the fourth year is based on the following three items: 1. Immunostaining of Tissue Microarray (TMA): E2F7 Expression in Tumor Tissue: Analysis of Correlation between TMA and Tumor Progression. 2. E2F7 and function analysis: 1). E2F7 mRNA expression was evaluated in 10 cancer cell lines and 1 normal epithelial cell line. 2). E2F7 development, cell growth, migration, infiltration, and cell transformation are regulated by siRNA for high growth strains. 3. Quantification of E2F7 expression in serum samples of cancer patients: The expression of E2F7 in serum samples of cancer patients treated with tumor resection, cancer tissues treated with tumor resection, and serum samples treated with tumor resection was modulated. The number of active and existing tumors is compared to the number of active tumors. The results of this study in 2010 and 2011 were as follows: 1. E2F7 was positive in 223 cases and negative in 53 cases Positive cases and negative cases had significant difference in the whole survival period (p=0.345). The positive cases and negative cases had no recurrence survival period (p=0.703). E2F7 development status and types of post-operative adjuvant chemotherapy (S-1) were analyzed. E2F7 negative cases were found in S-1 group and GEM group during the whole survival period (p=0.162). A positive case of E2F7 was found in S-1 group and GEM group, which was significantly better than that in the whole survival period (p=0.002). 2. The functional analysis of E2F7 in 10 cancer cell lines and 1 normal epithelial cell line confirmed that E2F7 mRNA expression was increased in Capan-1 and TU-8902 cancer cell lines. 3. 2. The analysis of serum samples begins at the beginning of the predetermined stage.