レドックスナノ粒子による脳梗塞再灌流障害治療および再生医療への有効性の検討

氧化还原纳米粒子用于脑梗塞再灌注损伤治疗和再生医学的有效性检验

• 批准号: 21K16626
• 负责人: 細尾 久幸
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16626/
• 关键词: レドナノックス粒子; 脳梗塞再灌流障害; 再生医療

サル主幹動脈閉塞モデルの作成；カニクイザルを用い、全身麻酔下に右大腿動脈に3Frガイディングシース留置。内頚動脈にScepter等のバルーン付きカテーテルを中大脳動脈 M1 起始部に誘導する。バルーンにて数時間閉塞しMRIで梗塞巣を評価する。さらに解除した後、神経学的評価とMRIによる画像評価、組織評価を実施している。Scepterはdouble lumenであり閉塞解除前より、内腔から薬剤を投与することが可能である。レドックスナノ粒子を閉塞中の脳へ直接投与する。閉塞後からの時間的MRI画像変化を撮像し、レドックスナノ粒子投与の有無で比較し有効性を評価している。① 脳梗塞Day7までの評価を目的として、レドックスナノ粒子投与4頭、コントロール生食投与4頭のモデル作成を行った。マイクロカテーテルで一過性脳虚血再灌流障害モデルを作成し、大脳皮質と基底核に脳梗塞が生じることが確認できて、サル脳梗塞モデルが完成した。翌日以降にMRIを撮影。DWI、FLAIR,T2のシークエンスを撮像し、脳梗塞巣を確認し、モデルを確立している。MRIで経時的に脳梗塞と脳浮腫のサイズと変化を確認できた。アップルテスト、行動テストにより神経症状の解析。モデルは、Day7でsacrificeした後に脳を摘出。脳梗塞病巣、対側の正常脳、各種臓器におけるレドックスナノ粒子の分布を評価するために組織の凍結保存を行った。凍結切片を作成して、各種蛍光免疫染色を実施し、投与したレドナノックス粒子の虚血脳への分布について検討を行っており、解析中である。免疫染色（CD31,NeuN, GFAP, Iba1）によりレドックスナノ粒子の脳内分布を評価している。② 脳梗塞Day28までの長期評価を目的として　、レドナノックス投与群2頭、コントロール群３頭を実施した。同様のMRIの評価、神経学的評価に加え、組織学的評価を実施している。投与するレドナノックスは蛍光標識しており、投与した脳内での分布の評価も合わせて実施している。

为猴子主动脉阻塞创建模型；使用cynomolgus猴子将3FR引导鞘放在全身麻醉下，将其放置在右股动脉中。配备气球的导管（例如权杖）被引导到颈内动脉中部大脑中部动脉M1的起源。梗塞在阻塞气球几个小时后通过MRI评估。进一步取消后，进行神经系统评估，通过MRI评估图像和组织评估。权杖是双管子，可以在闭塞之前从管腔中施用该药物。氧化还原纳米颗粒直接用于阻塞的大脑。成像闭塞后的时间MRI图像变化，并通过比较氧化还原纳米颗粒的存在或不存在来评估功效。 1）为了评估第7天的脑梗塞，我们创建了一个型号，该模型由四只动物接受氧化还原纳米颗粒和四只动物接受对照生食。使用微型导管产生了一种瞬时缺血 - 再灌注损伤模型，并证实大脑梗塞发生在大脑皮质和基底神经节中，并且完成了猴子脑梗塞模型。第二天或之后，采用了MRI。成像了DWI，FLAIR和T2的序列，并确认了脑梗塞，并建立了模型。 MRI证实了随着时间的流逝，大脑梗塞和脑水肿的大小和变化。使用Apple测试和行为测试分析神经症状。该模型在第7天牺牲后去除大脑。组织冷冻保存，以评估脑梗塞病变，对侧正常大脑和各种器官中氧化还原纳米颗粒的分布。制备冷冻切片，进行各种荧光免疫染色，并正在研究施用的红色纳米粒颗粒在缺血性大脑中的分布，并且正在进行分析。通过免疫染色（CD31，Neun，GFAP，IBA1）评估氧化还原纳米颗粒的大脑分布。 ②为了长期评估到第28天的长期评估，在Rednanox组中进行了两匹马，对照组进行了三匹马。除了类似的MRI评估和神经学评估外，还进行了组织学评估。要施用的红色毒素被荧光标记，并且还评估了给予的大脑中的分布。