低出生体重児の胎盤におけるエピゲノム変異と疾患モデルの創出

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ヒト低出生体重児（SGA）の病因として、胎盤の増殖と分化の障害が指摘されている。本研究では、SGAの胎盤細胞のエピジェネティックな分子機構を解析すること、ならびにSGAの3次元疾患由来胎盤オルガノイドモデルを用いて、その病態を再現することを目的としている。本年度（2年目）は、疾患TS細胞の樹立について検討した。満期胎盤のCT細胞から樹立した栄養膜細胞株は、増殖能が乏しく、初期胎盤由来のTS細胞と明らかに形態が異なっていた。また、老化マーカーであるSA β-Galの活性を調べたところ、この満期胎盤から樹立した栄養膜細胞株では強い活性が認められ、細胞老化を起こしていることが判明した。そこで、リプログラミングの手法を用いることで満期の胎盤からTS細胞を樹立するできるのではないかと考えた。満期胎盤の栄養膜細胞と初期胎盤由来のTS細胞の間で、遺伝子発現量の違いがないか検討し、3種類の転写因子の発現が著しく低いことを確認した。そこで、細胞老化抑制に作用するp53ドミナントネガティブ変異体（p53DN）と同時に3種類の転写因子をそれぞれ満期の栄養膜細胞に遺伝子導入した。その結果、特定の転写因子を加えた場合、TS様の形態を示す自己複製能力の高い細胞株が得られることが明らかとなった。また、この満期由来TS細胞の細胞分化能について解析したところ、ST細胞、EVT細胞へ正常に分化することが明らかとなった。 この手法を用いて、SGAの胎盤よりCT細胞を精製し、疾患由来TS細胞を作製することに成功した。