鼻腔内におけるアセチルコリン受容体発現パターンの異種間での比較検証

鼻腔乙酰胆碱受体表达模式的跨物种比较检查

• 批准号: 21K16850
• 负责人: 石川 正昭
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hyogo Prefectural Amagasaki General Medical Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16850/
• 关键词: マウス; ラット; 篩骨洞; 下鼻甲介; アセチルコリン受容体; コリン作動性抗炎症反応経路; アセチルコリン; 慢性副鼻腔炎

本研究では、異種間での鼻腔内でのコリン作動性抗炎症反応経路に関与する遺伝子発現の差を検証するために、トランスクリプトーム解析を行うこととした。収集部位は、篩骨洞粘膜・下鼻甲介粘膜で、部位別間の検証も行うこととした。マウス3匹、ラット3匹の鼻腔内組織から篩骨洞粘膜・下鼻甲介粘膜を収集した。下鼻甲介粘膜に関しては収集は容易であったが、篩骨洞粘膜の収集は部位の同定が不可能であった。特にマウスに関しては、篩骨洞粘膜と同定できるほどのメルクマールが存在せず、さらにトランスクリプトーム解析を行えるほどの十分な検体量収集は不可能であった。これらの結果から、マウス・ラットを対象とした研究を断念し、ヒト検体のサンプルで検証を重ねることにした。ヒト検体では、非慢性副鼻腔炎の症例における同一個体から篩骨洞粘膜と下鼻甲介粘膜を収集し、合計 n = 3でトランスクリプトーム解析を行った。合計1796の発現変動遺伝子を得ることができたが、この中にアセチルコリン受容体に関連する遺伝子の発現は含まれていなかった。次に非慢性副鼻腔炎の症例から得られた篩骨洞粘膜（n ≒ 3)と非好酸球性副鼻腔炎の篩骨洞粘膜 (n = 5)をトランスクリプトーム解析したところ、18788の発現変動遺伝子を得ることができた。しかしながら、この中にもアセチルコリン受容体に関連する遺伝子の発現は含まれていなかった。クラスタ解析を行ったところ、5つのクラスタ分類が可能となり、各クラスタにおいて500以上の発現変動遺伝子を得ることができた。アセチルコリン受容体に大きな差は認めなかったが、これらの発現変動遺伝子がどのような臨床的意義を有するかを今後検証していく予定である。

在这项研究中，我们决定执行转录组分析，以验证与不同物种之间鼻内胆碱能抗炎反应途径有关的基因表达差异。收集部位是筛窦粘膜和下涡轮粘膜，还确认该部位已得到验证。从三只小鼠和三只大鼠的鼻内组织收集筛窦粘膜和下鼻甲粘膜。该系列对于下涡轮粘膜很容易，但是不可能识别收集蛋白体粘膜的位置。特别是对于小鼠而言，没有足够的Mercummar来鉴定筛窦粘膜，也无法收集足够的样品体积来进行转录组分析。基于这些结果，我们决定放弃对小鼠和大鼠的研究，并继续使用人类样品样本进行验证。在人类标本中，在非chronic鼻窦炎的情况下，从同一个体收集了筛窦粘膜和下涡轮粘膜，并以n = 3的总数进行了转录组分析。总共获得了1796个可变表达基因，但未获得乙酰胆碱受体相关基因的表达。接下来，从非核鼻窦炎的病例获得的筛窦粘膜（N≈3）和筛窦粘膜（n = 5）的转录组分析，以及蛋po鼻窦粘膜（n = 5）的非嗜代性粒细胞性鼻窦炎，表明18788可变表达基因已获得18788的可变表达基因。但是，这也不包括与乙酰胆碱受体相关的基因的表达。群集分析允许五个群集分类，并且在每个群集中获得了500多个可变表达基因。尽管乙酰胆碱受体没有显着差异，但我们计划将来研究这些可变表达基因的临床意义。