H19長鎖非コードRNAの作動原理に基づく核酸医薬による神経障害性疼痛治療

H19 基于长链非编码RNA工作原理的核酸药物治疗神经病理性疼痛

基本信息

批准号：
21K17132
负责人：
伊藤孝哉
金额：
$ 3万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

体性感覚神経の障害に伴う神経障害性疼痛は、特に歯科麻酔領域においては三叉神経痛や舌咽神経痛などが挙げられるが、慢性に経過し難治性で苦痛が強いため、積極的に治療することが求められる。近年では、神経障害性疼痛の病態生理において、末梢神経系における神経炎症の重要性が言われている。末梢神経系のグリア細胞であるシュワン細胞も炎症性サイトカインや神経栄養因子などの様々な液性因子を産生・放出することで末梢感覚神経の感作を引き起こすとされていて、シュワン細胞においてこれらの炎症性物質が協調して調節されていることが知られている。長鎖非コードRNAであるH19は様々な作動原理を通して炎症性疾患に関連し、これまでに様々な細胞腫において多くの液性因子の発現調節を担うことが報告されている。しかし、H19は幅広く炎症性物質の制御に関わるにもかかわらず、標的遺伝子の発現調節機構は個別にしか検討されていなかった。最近、申請者らは、H19がシュワン細胞で神経障害により持続的に且つ劇的に増加していることを明らかにし、更にそのシュワン細胞にレンチウイルスベクターを使用して、H19を効率的に遺伝子導入できる手法を確立した。現在、遺伝子導入を行ったシュワン細胞株に対してRNAシーケンスを行い、発現変化する遺伝子群を同定した。さらに、これらの遺伝子群から神経炎症に関わる遺伝子をバイオインフォマティクス解析から抽出した。今後は、バイオインフォマティクス解析により見出したH19の作用を仲介する可能性があるタンパク質分子の発現やリン酸化における変動をウェスタンブロットにより確認する予定である。

与体感神经疾病相关的神经性疼痛可能包括三叉神经痛和全脑性神经痛，尤其是在牙齿麻醉领域，但它是慢性且可悲且疼痛的，因此有必要主动治疗它。近年来，在神经性疼痛的病理生理学中讨论了神经炎症在周围神经系统中的重要性。雪旺氏细胞是周围神经系统的神经胶质细胞，也据说通过产生和释放各种体液因子（例如炎性细胞因子和神经营养因素）引起周围感觉神经的敏感性，并且已知这些炎症物质在schwann细胞中是协调的。 H19是一种长链非编码RNA，通过各种手术原理与炎症性疾病有关，据报道是导致各种细胞瘤中许多体液因子表达的调节。然而，尽管H19参与了广泛的炎症物质的调节，但仅研究了靶基因表达调节的机制。最近，申请人透露，由于Schwann细胞中的神经损害，H19正在连续和急剧增加，并且还建立了一种使用Schwann细胞中使用慢病毒载体有效转染H19的方法。目前，通过在Schwann细胞系上的RNA测序进行基因转移，以鉴定改变表达的基因组。此外，从生物信息学分析中从这些基因组中提取了参与神经炎症的基因。将来，我们计划确认可能介导H19作用的蛋白质分子的表达和磷酸化的变化，这些作用是通过生物信息学分析通过蛋白质印迹发现的。