動物モデルを用いた出血様式の違いが局所的循環障害と血液凝固障害に与える影響の研究

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法医学分野では病死などの場合は心臓内軟凝血がみられ、急死では心臓内に流動血がみられることがよく知られている。また、救急医療分野では外傷・出血により血液凝固が正常に機能しない例が報告されている。これらは出血による組織低酸素状態により凝固系・線溶系の不均衡が起きることが要因とされている。組織低酸素は出血量だけではなく、動脈出血と静脈出血のような出血様式の違いが影響すると考えられる。本研究では動脈性出血と静脈性出血の違いと局所循環との関連を明らかにし、凝固線溶系への影響を検討することを目的としている。方法として動脈性出血モデルと静脈性出血モデルを作成し、それぞれの出血による組織循環障害の現れ方の違いを評価する。組織循環の評価方法として、細胞ミトコンドリアの酸素消費量等を細胞外フラックスアナライザーを用いて測定を試みている。1) 動脈出血モデルラット及び静脈出血モデルラットの作成：大腿動脈及び大腿静脈にカテーテルを挿入し、出血モデルラットを作成した。出血量は全身血液量の45%に設定した。2) ミトコンドリア呼吸の測定：ラット心臓・肝臓・腎臓を破砕し遠心処理によりミトコンドリアを抽出、測定に使用した。動物実験室及び測定室の室温が、臓器破砕処理及びミトコンドリア呼吸に影響する可能性を考慮し、適切な実験環境について検討した。前述の全身血液量45%の出血から1時間後のサンプル臓器で肝臓ミトコンドリア呼吸を測定したところ、動脈出血に比べて静脈出血で最大酸素消費速度が低下する傾向にあった。3) 血液凝固系・線溶系の測定：-80℃保存している血漿・血清サンプルを用いて、凝固線溶系の測定を随時実施する予定である。4) ミトコンドリア構造に関わる蛋白質について調べ、酸素消費との関与を検討する予定である。