高アスペクト比を有するポリイオンコンプレックスベシクルの創製

高纵横比聚离子复合囊泡的制备

• 批准号: 22K14735
• 负责人: 藤田 聖矢
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14735/
• 关键词: ペプチド; ベシクル; タンパク質輸送

我々はこれまでPICsomeを植物への酵素輸送キャリアとして応用を行ってきた。近年、球状よりもアスペクト比の高いロッドやチューブ状 集合体の方が植物への輸送効率に優れていることが報告された。 そこで、本研究では植物への高効率な酵素輸送を目指して、半透性を有するアスペクト比の高いベシクル状集合体の構築を検討した。チューブ 集合体形成促進のためにトリグリシン(Gly3)配列を導入したPIC形成ペプチドを合成し、それらを集合させることで、アスペクト比の高い新規PICsomeの構築する。これまで、種々のペプチドをベシクル形成に用いて来た。その中でも最近、オリゴサルコシン鎖を有する12残基のリジンの側鎖をカルボキシル化すると、低濃度で100nm程度のベシクルを形成することを見出している。そこで、本年度は、PICsomeを形成することを見出したペプチド配列Mal-Sar4-K(COOH)12にGly3を付与したペプチドMal-Sar4-K(COOH)12GGGの合成に取り組んだ。ペプチドのN末端側には種々の機能性ペプチドを就職できるように、これまで通りチオールと反応することが知られているマレイミド基を付与した。そのため、トリグリシン配列はペプチドのC末端に付与した。このペプチドを固相合成法によって合成した。その後、MALDI-TOF-MSによって、目的のペプチドが合成できていることを確認した。これを逆相HPLCによって、精製した。収率は良好であった。次に、側鎖をカルボキシ基に変換する前に、このペプチドの二次構造を調べるために、ペプチド水溶液を調製し、円二色性スペクトルを測定した。その結果、ペプチドは水中でランダムコイル構造を形成していることを確認した。

I 々 は こ れ ま で PICsome を plant へ の enzyme conveying キ ャ リ ア と し て 応 line with を っ て き た. In recent years, globular よ り も ア ス ペ ク ト higher than の い ロ ッ ド や チ ュ ー ブ aggregate の party が plant へ の conveyor working rate に optimal れ て い る こ と が report さ れ た. そ こ で, this study で は plant へ の high working rate な enzyme conveying を refers し て, half permeability を す る ア ス ペ ク ト higher than の い ベ シ ク ル aggregate の build を beg し 検 た. チ ュ ー ブ aggregate formation promote の た め に ト リ グ リ シ ン (Gly3) with column を import し た PIC form ペ プ チ ド を synthetic し, そ れ ら を collection さ せ る こ と で, ア ス ペ ク ト higher than の い new rules PICsome の build す る. Youdaoplaceholder5 れまで, 々 々 ペプチドをベシ ペプチドをベシ に た た に に using て て to た. In そ の で も recently, オ リ ゴ サ ル コ シ ン lock has す を る 12 residues の リ ジ ン の side chain を カ ル ボ キ シ ル change す る と で 100 nm, low concentration degree の ベ シ ク ル を form す る こ と を see out し て い る. そ こ で, this year's は, PICsome を form す る こ と を shows し た ペ プ チ ド match column Mal - Sar4 - K (-cooh) group 12 に Gly3 を give し た ペ プ チ ド Mal - Sar4 - K (-cooh) group 12 GGG の synthetic に group take り ん だ. ペ プ チ ド の N terminal side に は kind 々 の functional ペ プ チ ド を inauguration で き る よ う に, こ れ ま で tong り チ オ ー ル と anti 応 す る こ と が know ら れ て い る マ レ イ ミ ド base を give し た. Youdaoplaceholder0 ため, トリグリシ ため are arranged with ペプチド ペプチド, and the c-end に is given to た た. Youdaoplaceholder0 ペプチドを solid-phase synthesis によって た. After そ そ, MALDI-TOF-MSによって, objective ペプチドが ペプチドが synthesis で て て る る とを とを confirmation of た た. Youdaoplaceholder0 れを reversed-phase HPLCによって, refining た た. The yield is good であった. Time に, side lock を カ ル ボ キ シ base に variations in す る に, こ の ペ プ チ ド の secondary tectonic を adjustable べ る た め に, ペ プ チ ド を し modulation, aqueous solution has drifted back towards ¥ dichroism ス ペ ク ト ル を determination し た. そ の results, ペ プ チ ド は water で ラ ン ダ ム コ イ を ル structure form し て い る こ と を confirm し た.