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ウイルスベクターを利用した野生種植物の遺伝子機能検証基盤の構築

利用病毒载体验证野生植物基因功能平台的构建

基本信息

批准号：
22K14872
负责人：
有賀裕剛
金额：
$ 3万
依托单位：
National Agriculture and Food Research Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14872/
关键词：
ウイルスベクター遺伝資源作物近縁野生種

项目摘要

野生種植物が示す耐性や抵抗性を支配する鍵遺伝子を同定することは重要である。多様な野生種植物の中には過酷な生育環境し、特異な形質を示すものが存在する。このような野生種が示す形質が、どの遺伝子によって決定づけられているかを明らかにできれば、作物育種あるいは植物科学に新たな知見をもたらすと期待される。しかし多くの野生種は形質転換系がなく、候補遺伝子の機能を直接検証することが困難である。そこで本研究では申請者らの研究グループで解析が進んでいるVigna属（アズキやササゲの仲間）野生種をモデルケースとして、対象とする野生種植物に最適化されたウイルスベクターの構築と、それを利用した遺伝子機能の検証手法の確立を目指す。本課題では第一に、Vigna属野生種植物の自生地で実際に感染しているウイルスを単離することに着手した。Vigna属野生種の自生地から葉サンプルを収集し、RNA-seq解析を実施した結果、Bean common mosaic virus (BCMV)とCucumber mosaic virus (CMV)の２種のウイルスが検出された。これらのウイルスを単離し、ウイルスの感染性クローン(cDNA)を合成した。次いでウイルス感染性クローンに外来遺伝子を組込むための制限酵素サイトを付加することで、ウイルスベクターを構築した。CMV ベクターを用いることでVigna属野生種の内在遺伝子の発現量を抑制すること、BCMVベクターを用いることで遺伝子組換えなしに外来遺伝子を発現させることにそれぞれ成功した。

Wild plants show that they are tolerant and resistant. The seeds of the wild plants are the same as those of the wild plants. A variety of wild plants are affected by the cool growth environment and special shapes to show that there is a virus in the plant. In order to improve the quality of the wild animal, it was decided that the plant science of the plant science and plant science of the plant science of crop breeding should be informed of the new information and expectations of the plant science. There is a lot of food in the wild, and the machine is capable of direct monitoring and monitoring. In this study, applicants were asked to apply for information. In this study, there was a general analysis of the application of the genus Vigna. The wild species of the genus were used to make sure that the target was verified by the use of the machine. In the first part of this project, the wild species of the genus Vigna are born in the area where they are infected internationally. Vigna belongs to two kinds of wild wild oysters, the results of RNA-seq analysis, and the results of Bean common mosaic virus (BCMV) and Cucumber mosaic virus (CMV). The virus was isolated, the virus was infected, and the cDNA was synthesized. The secondary infection was caused by the infection. The exotic tissue was used to limit the production of enzymes. CMV has been used in wild species of the genus Vigna to suppress the amount of DNA in the wild species, and the sub-group in the BCMV has been used to detect the success of the foreign virus.