カイコ断片染色体を利用した人工染色体作製と断片染色体脱落率決定因子の同定

家蚕片段染色体人工生产染色体及片段染色体脱落率影响因素的鉴定

• 批准号: 22K14900
• 负责人: 日野 真人
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14900/
• 关键词: カイコ; 断片染色体; 人工染色体; フローサイトメーター; パルスフィールド電気泳動

研究材料として使用するカイコm201系統について、パルスフィールド電気泳動にて断片染色体の存在を確認した。また、パルスフィールド電気泳動にて分離した断片染色体が存在するゲルの領域を切り出して、断片染色体のみを分離した。当初はこのパルスフィールド電気泳動にて断片染色体を単離・使用する予定であったが、フローサイトメーターにて染色体を分離し断片染色体を単離することを試みた。変更理由としては、より染色体をインタクトな状態で取得することができると考えられるためであり、近年ヒトやマウスの細胞を実験材料としてフローサイトメーターにて内在染色体を分離したという報告がなされている。その報告を参考にカイコ断片染色体の分離を試みた。しかしながら、カイコ染色体のサイズが小さく、他の生物で行われている条件では、うまく染色体を分離することができなかった。そこで、染色体を分離するサンプルの検討やDNA染色方法の検討を行った。条件検討としては、着実に進んでいるものの、最終的な条件決定までには至っていない。また、フローサイトメーターによる断片染色体の分離と並行して、断片染色体の配列決定実験のために、由来が同じであるm201系統とm203系統について既にゲノム配列が判明しているp50系統とのバッククロスを実施した。今後は、このバッククロス系統のゲノムをNGSにて解析することによって、断片染色体の配列を明らかにする予定である。

The research materials were used to confirm the existence of chromosomes in the fragments of the M201 system. There are two kinds of chromosomes in the field of electrophoretic electrophoresis, such as electrophoretic electrophoresis, and so on. In the first place, the chromosome isolation of fragments was performed by electrophoretic electrophoresis. the predetermined chromosome isolation was used to isolate the fragment chromosomes. For more reason, the chromosomes and chromosomes have been separated from each other. In recent years, there has been an increase in the number of cells. In recent years, there has been an increase in the number of cells. In the report, please refer to the fragment chromosome isolation test. The chromosomes are isolated, the chromosomes are separated, and the chromosomes are separated. Chromosome isolation, chromosome isolation, DNA staining, chromosome isolation, chromosome isolation The conditions determine the conditions, the conditions determine the conditions, and the most important conditions determine the conditions. In order to determine the performance of the M201 system in the M203 system, it is determined that the p50 system is the same as that in the M203 system. In the future, the whole system will be analyzed by NGS analysis, and the fragment chromosomes will be arranged in a predetermined sequence.

项目成果

カイコ人工染色体作製に向けた染色体単離手法の検討

家蚕人工染色体生产染色体分离方法的检验

• 发表时间: 2023
• 作者: 足立 朋範・日野 真人・門 宏明・日下部 宜宏