ポリコームの発生時期依存的な発現ダイナミクスと細胞分化ポテンシャルの関係性の解明

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細胞が特定の分化運命にコミットすると、それ以外の分化運命に関わる遺伝子群は発現抑制される。この分化遺伝子群の抑制において、ポリコーム群タンパク質（以下、ポリコーム）が中心的な役割を果たすことが知られている。ポリコームは基本的には複合体(ポリコーム複合体)を形成することで転写抑制に寄与する。ポリコーム複合体には様々な種類のバリアント（構成因子の異なるポリコーム複合体）が存在するが、構成因子の機能の違いについては必ずしも明らかになっていない。本年度は、ポリコーム複合体構成因子において神経幹細胞の分化能の転換過程で発現変動の大きい因子に関してChIP-Seqを行った。その結果共局在する領域だけではなく特定の因子に依存するような領域があることを発見した。また免疫染色をおこなったところ、同様の傾向が見られた。多重染色を行うためにラベル化抗体の作製やエピトープタグノックインマウスの作製も行いワークチェックを行なった。次年度ではこの作製した抗体やエピトープタグノックインマウスを用いて共局在性を検証し、それぞれの特異的因子による制御の詳細を明らかにしていく。また、ニューロンでは細胞分裂が起こらないので、遺伝子ノックアウトを行った際にタンパク質が完全に枯渇するまでに時間がかかってしまうのが問題となる。そのため、今年度にポリコームの制御を今後解析していくためプロテインノックダウンの実験系を導入し実験系がワークするのを確認した。