Development of Novel Anti-Allergic Drug Using Strategic IgG Antibody Processing Technology

利用战略性IgG抗体加工技术开发新型抗过敏药物

• 批准号: 22K15280
• 负责人: 鈴木 瑠理子
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15280/
• 关键词: マスト細胞; 単価ハプテン; Fc受容体; 細胞骨格; アレルギー; ハプテン; IgG

単価ハプテンによるマスト細胞活性化抑制機構解明のため、以下の実験を行った。・細胞内Caイオン濃度上昇抑制機構の解明単価ハプテンによる多価抗原刺激後の細胞内Caイオン濃度上昇の抑制が、小胞体からのCaイオンの遊離に影響を及ぼすかどうかを調べるために、mag-fluo4 AMを用いて測定を行った。その結果、単価ハプテンを添加した時点で、小胞体から細胞質へのCaイオンの遊離が停止することが明らかとなった。さらに、Caイオン排出ポンプにも影響を及ぼすかについて調べるために、PMCAの阻害剤のcarboxyeosin、NCK・NCKX阻害剤のKB-R7943を用いて細胞内Caイオン濃度測定を行うための実験系を確立した。・細胞骨格系タンパク質へ及ぼす影響の解明アクチン脱重合に関与するcofilinの活性（リン酸化レベル）を制御することが知られているLIMKinaseとslingshot (ホスファターゼ）に着目して実験を行った。cofilinは多価抗原刺激後１分前後で一時的に脱リン酸化（活性化）することはマスト細胞においても知られているが、多価抗原刺激後のslingshotとLIMKinaseの活性については不明であったため、まず、多価抗原後の各時点におけるリン酸化レベルの変化についてウエスタンブロット法にて検討を行った。その結果刺激１分前後でslingshotは脱リン酸化（活性化）することが確認された。一方で、LIMKは脱リン酸化（不活性化）することが確認され、この不活性化は少なくとも５分後まで持続した。そこで、多価抗原刺激後に単価ハプテンを添加した場合におけるこれらのタンパクへの影響を確認したところ、slingshot、LIMKは迅速にリン酸化されることが明らかとなり、単価ハプテンによりこれらのタンパク質の活性が迅速に変化することでcofilinの活性を制御することが示唆された。

Youdaoplaceholder0 による による スト スト Cell activation inhibition mechanism explanation 単価ハプテ ため the following <s:1> experiment を work った. Elevated levels inhibit, intracellular Ca イ オ ン institutions の interpret 単 価 ハ プ テ ン に よ る の 価 antigen stimulation more intracellular Ca イ オ ン concentration rise の restrain が, small cell body か ら の Ca イ オ ン の free に influence を and ぼ す か ど う か を adjustable べ る た め に, mag - fluo4 AM を い て line measurement を っ た. そ の results, 単 価 ハ プ テ ン を add し た point で, small cell body か ら cytoplasm へ の Ca イ オ ン の free が stop す る こ と が Ming ら か と な っ た. さ ら に, Ca イ オ ン discharge ポ ン プ に も influence を and ぼ す か に つ い て adjustable べ る た め に, PMCA の resistance against tonic の carboxyeosin, NCK NCKX resistance against tonic の KB - R7943 を with い て intracellular Ca イ オ ン concentration measurement line を う た め の be を 験 department establish し た. Cells, bone is タ ン パ ク mass へ and ぼ す influence の interpret ア ク チ ン overlap に off masato and す る cofilin の activity (リ ン acidification レ ベ ル) を suppression す る こ と が know ら れ て い る LIMKinase と slingshot (ホ ス フ ァ タ ー ゼ) に with mesh し て be 験 を line っ た. Cofilin は 価 antigen stimulation more で before and after 1 minute, after a temporary に リ off ン acidification (active) す る こ と は マ ス ト cells に お い て も know ら れ て い る が, multiple 価 antigen stimulation の slingshot と LIMKinase の active に つ い て は unknown で あ っ た た め, ま ず, multiple 価 antigen の after each point に お け る リ ン acid To make レベ ブロット change に った てウエスタ てウエスタ ブロット law にて検 discuss を practice った. Youdaoplaceholder0 <s:1> results: でslingshot <s:1> deacidification (activation) リ <s:1> とが とが confirm された before and after 1 minute of stimulation. Side で, LIMK は リ off ン acidification (inactive) す る こ と が confirm さ れ, こ の less activeness は な く と も five points after ま で hold 続 し た. そ こ で, multiple 価 antigen stimulation に 単 価 ハ プ テ ン を add し た occasions に お け る こ れ ら の タ ン パ ク へ の influence を confirm し た と こ ろ, slingshot, LIMK は quickly に リ ン acidification さ れ る こ と が Ming ら か と な り, 単 価 ハ プ テ ン に よ り こ れ ら の タ ン パ ク qualitative の active が に quickly - the す る こ と で cof package ilin を active を control する された とが abette された.

项目成果

マスト細胞のFc受容体の架橋状態の変化によるアクチン脱重合シグナル調節機構

肥大细胞Fc受体交联状态变化的肌动蛋白解聚信号调节机制

• 发表时间: 2023
• 作者: 鈴木 瑠理子;伊納 義和;横川 慧;古野 忠秀;平嶋 尚英
• 通讯作者: 平嶋 尚英

マスト細胞におけるアクチン重合・脱重合制御シグナル機構の研究

肥大细胞肌动蛋白聚合与解聚信号机制研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木 瑠理子;伊納 義和;横川 慧;古野 忠秀;平嶋 尚英
• 通讯作者: 平嶋 尚英

IgE受容体の架橋状態の変化によるマスト細胞のアクチンダイナミクス制御シグナル機構

通过 IgE 受体交联状态的变化控制肥大细胞肌动蛋白动力学的信号机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木 瑠理子;伊納 義和;横川 慧;古野 忠秀;平嶋 尚英
• 通讯作者: 平嶋 尚英