权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Search for neutralizing antibodies that recognize the S2 region of SARS-CoV-2 spike protein

寻找识别 SARS-CoV-2 刺突蛋白 S2 区域的中和抗体

基本信息

批准号：
22K15284
负责人：
山本雄一朗
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15284/
关键词：
SARS-CoV-2 スパイクタンパク質 S2 subunit 中和抗体

项目摘要

本研究では，特にS2領域を新規エピトープに持つSARS-CoV-2中和抗体に着目し，その抗体によるスパイクタンパク質の認識機構を詳細に解析し，感染阻害活性の発現メカニズムを明らかにすることを目的とする．我々はこれまでに武漢型と変異株のSARS-CoV-2の間でアミノ酸変異が少ないRBD領域，S2領域をエピトープとする複数のマウスモノクローナル抗体（CvMab-6，-62）を同定している．そこで今年度は，これらの抗体において，武漢型および変異型スパイクタンパク質を発現する組換えシュードタイプウイルスを作製し，中和活性を評価した．また，SARS-CoV-2スパイクタンパク質への親和性を確認するために,武漢型および変異型スパイクタンパク質を過剰発現させたHEK293T細胞を用いて，各種スパイクタンパク質への反応性をWestern Blotting，免疫蛍光染色にて評価した．さらに2種類の抗体と武漢株およびオミクロン株の3量体組換えスパイクタンパク質との結合親和性をELISA法にて評価した．抗S2抗体であるCvMab-62は，抗RBD抗体CvMab-6と比較して，武漢型シュードタイプウイルスに対する中和活性が高かった．しかしながら，CvMab-62の中和活性は，変異型シュードタイプウイルスでは中和活性が減弱する傾向が確認された．一方で，CvMab-62はオミクロン型を含めた変異株スパイクタンパク質を認識し，武漢株およびオミクロン株いずれにおいても，CvMab-6よりも10倍以上Kd値が低く，スパイクタンパク質との親和性が高いことが明らかとなった．以上の結果から，S2領域を標的としたCvMab-62は，スパイクタンパク質との結合親和性を向上させることにより，中和活性を増強させた可能性が示唆された．

The purpose of this study is to focus on SARS-CoV-2 neutralizing antibodies in the field of S2. This study is aimed at the detection of neutralizing antibodies. The infection blocking activity was not detected. I was told that there was a significant increase in the number of antibodies (CvMab-6,-62) in the field of RBD and S2 in the field of RBD. This year, we found that the antibody (CvMab-6,-62) was identical. Wushu-type malaise-type malaise-type malocclusion-type malaise-type malfunction-type malfunction-type parasite-type malfunction-type cymbal-type virus-type-- type Anti-Western Blotting, immuno-fluorescent staining, anti-RBD, anti-S2, anti-RBD, anti-RBD. The CvMab-62 type has the ability to neutralize the activity, the activity is high, the activity is high, the activity is low, the activity is weak, the activity is low, and the CvMab-62 is The results of the above results show that the results of the above tests, the results of the S2 field tests, the results of the S2 field tests, the results of the above tests, the results of the above results, the results of The neutralization activity indicates that the possibility of neutralization is instigated.