シトクロムP450による肝障害惹起の機構解明：終末糖化産物に対する感受性の上昇

阐明细胞色素P450诱导肝损伤的机制：对晚期糖基化终产物的敏感性增加

基本信息

批准号：
22K15330
负责人：
宮内優
金额：
$ 3万
依托单位：
Sojo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

シトクロムP450 (CYP) は主に肝臓に分布し、医薬品を含む生体外異物の酸化を触媒することで解毒する重要な薬物代謝酵素である。CYPの特徴の一つに、特定の化学物質に曝露することによりその発現量が大きく増加する酵素誘導が挙げられる。CYP誘導作用のある化合物への曝露が慢性化することで肝臓がんなどの肝疾患の引き金となるが、その分子機構は明らかになっていない。一方、糖化産物は糖とアミノ酸の非酵素的な結合で生じる化合物の総称であり、加齢とともに体内に蓄積され、糖尿病や肝炎などの原因になる。本研究では、「慢性的に誘導されたCYPが肝臓の糖化産物に対する感受性を上昇させることが、肝疾患を惹起する因子の一つである」との仮定の下、検証を行っている。本研究でモデルとして着目したヒト肝臓がん由来のHuh-7細胞では、内因性のCYPおよび酵素誘導に必要な因子はほとんど発現していない。そこで、主要なCYP分子種であるCYP3A4とCYP2E1とをエピソーマルベクターに組込み、導入することを目指した。各種トランスフェクション試薬やエレクトロポレーションを用いて検討したが、いずれの方法でも十分な導入には至らなかった。モデル細胞を変更するなどの見直しが必要である。一方、これまで着目してきた糖化産物ジヒドロピラジンの研究では、その急性毒性を主要な糖化産物（カルボキシメチルリジン、アクリルアミド）と比較することで、ジヒドロピラジンの活性酸素種の産生能が急性毒性に大きく寄与することを明らかにした。

细胞色素P450（CYP）是主要分布在肝脏中的关键药物代谢酶，是一种重要的药物代谢酶，可以将包括药物在内的体外异物的氧化解毒。 CYP的特征之一是诱导酶，当暴露于特定的化学物质时，它大大提高了表达水平。长期暴露于具有CYP诱导作用的化合物触发肝癌等肝癌，但尚未阐明这种类型的分子机制。另一方面，糖基化产物是当糖和氨基酸之间的非酶键结合到体内并随着年龄的增长而导致糖尿病，肝炎和其他原因时积累的化合物的一般术语。这项研究研究了“诱导肝病的因素之一是长期诱导的CYP会增加对肝糖化产物的敏感性”的假设。在源自人肝癌的HuH-7细胞中，我们将其作为一个模型中的模型，几乎没有观察到内源性CYP和酶诱导所需的因素。因此，我们旨在将主要的CYP分子物种（CYP3A4和CYP2E1）纳入偶发矢量。尽管使用了各种转染试剂和电穿孔，但这些方法均无法提供足够的引入。有必要审查，例如更改模型单元格。另一方面，在迄今为止我们已经关注的糖基化产物二氢吡嗪的研究中，我们透露，通过将其急性毒性与主要糖基化产物（羧甲基胆碱，丙烯酰胺）进行比较，二羟基吡啶的能力，二羟基吡啶的能力产生反应性氧氧的能力显着贡献了急性毒性。