血管内皮障害に着目した薬剤性腎障害の発症機序の解明と新規治療戦略の確立

阐明药物性肾损伤发病机制并建立以血管内皮损伤为重点的治疗新策略

• 批准号: 22K15342
• 负责人: 山田 悠人
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15342/
• 关键词: シスプラチン; 腎障害; グリコカリックス; 血管内皮

本研究はシスプラチンによる薬剤性腎障害の発症メカニズムについて、血管内腔のグリコカリックス（GLX）に着目し、GLXの脱落が薬剤性腎障害の発症および重篤化に及ぼす影響について検討するものである。2022年度はGLXノックアウトマウスを用いてGLXの脱落が組織へのシスプラチン移行を助長し、薬剤性腎障害を誘発する仮説を立証するため、まずは血中、尿中、組織中のシスプラチン濃度測定系の構築を行った。これまで報告された測定法を参考に、有機溶媒を用いた除タンパク法と逆相条件でのHPLC-MS/MSを用いたシスプラチンの測定系の構築に着手した。逆相カラムで水およびメタノールの移動相条件でシスプラチンのイオン化効率を確認したが、酸性（pH=4）・中性(pH=7)・塩基性(pH=9)条件いずれもシスプラチンのイオン化効率を確認したところ、酸性条件下の方がイオン化効率がよいことが分かった。その他にもアセトニトリルへの変更や、酢酸アンモニウムやギ酸アンモニウム等の緩衝液の追加など様々な移動相条件で検討したが、最も感度良く測定できた0.2%ギ酸入りアセトニトリルと0.2%ギ酸入り水を用いた移動相条件でも定量限界は約10μg/mLであった。マウスにシスプラチンを投与した際の想定される下限濃度は約0.1μg/mLg/mLであり、実検体の測定は難しいことが予想された。そのため、現在はジエチルジチオカルバミン酸を用いたシスプラチンを誘導体化に着目し、より高感度に測定できる系の確立を行っている。

In this study, the symptoms of sexual disorder (STD), vascular endovascular disease (GLX), GLX exfoliation, sexual disorder, severe disease and shadow disorder were studied. In the year 2022, the tissue tissue samples were collected from the tissue after the use of GLX in the year of 2022. The results showed that the levels of serum, urine and tissue samples were determined by the determination of the concentration of GLX in blood, urine and tissue. This method is used for reference, and the organic solvent is used to determine the reverse phase condition of the HPLC-MS/MS. The system is determined by the temperature measurement method. In the reverse phase, the temperature difference is different from that in the normal phase. Under the condition of acid (pH=4), neutral (pH=7) and basic (pH=9), the conversion rate is high. Under the acid condition, the conversion rate is high, and under acid condition, the conversion rate is high. This method is used to determine the concentration of acid in the solution, such as the temperature, the temperature, Please tell me that the lower limit is about 0.1 μ g