免疫応答におけるcGAS/STING/TBK1経路の新規制御機構の解明

阐明免疫反应中 cGAS/STING/TBK1 通路的新型调节机制

• 批准号: 22K15398
• 负责人: 東 覚
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15398/
• 关键词: 自然免疫; 自己免疫疾患; TBK1

ウイルスや細菌由来の外来DNAを認識し、自然免疫応答を誘導する生体防御システムとしてcGAS/STING/TBK1経路が知られている。近年、この経路が細胞質に漏出した自己DNAに応答し、炎症病態を惹起して様々な自己免疫疾患の発症に関与することが報告されている。このシグナル伝達経路の中でTBK１は、上流シグナルが集約されるシグナル伝達ハブ分子にあたる。これまでの実験において、TBK1の結合分子スクリーニングを実施した結果、TBK1の新規結合候補分子Xを同定している。この分子Xは自己免疫疾患に関与することが示唆されており、当研究課題では、分子XによるTBK1の活性制御機構の解明と分子Xが関与するとされる自己免疫疾患の病態解明を目的としている。当該年度ではTBK1と分子Xの結合様式の解析を実施した。まず、TBK1と分子Xの遺伝子クローニングおよび両分子のドメイン変異体の作製を行った。次にそれらを培養細胞に過剰発現させた後に、結合解析実験として共免疫沈降実験を行った。その結果、TBK1と分子Xは互いのコイルドコイルドメインを介して相互作用していることが明らかとなった。また、培養細胞において、内在性レベルのTBK1と同じく内在性レベルの分子Xとの結合を分子Xの抗体を用いた共免疫沈降実験にて確認した。次年度以降に予定している動物個体レベルでの解析に必要となる分子Xの遺伝子ノックアウトマウスについては、実験群の確保のためにヘテロマウスを掛け合わせ繁殖を進めている。

It is important to understand the origin of foreign DNA and the induction of natural immune responses, and to understand the cGAS/STING/TBK1 pathway. In recent years, there have been reports of cytoplasmic leakage, DNA damage, inflammation, and immune disease. This is the first time that a person has ever been involved in a crime. The results of the implementation of the new binding candidate molecule X for TBK1 are as follows: The molecular X is related to the pathogenesis of autoimmune diseases, and the molecular X is related to the pathogenesis of autoimmune diseases. The analysis of TBK1 and molecular X combinations was carried out during the year. The molecular X gene of TBK1 and TBK2 was selected from the group consisting of the following genes: In addition, the cells were cultured and analyzed in vitro. As a result, it is now clear that TBK1 and molecule X interact with each other through the interaction of coiled-coiled-material. In addition, the intrinsic protein of TBK1 in cultured cells was confirmed by immunostaining with antibodies to molecule X. In the next year, it is necessary to analyze the individual animal species in a predetermined period of time, and to ensure the reproduction of the species in a population.