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組織プロセッサー（密閉式自動固定包埋装置）内の薬液が核酸品質に及ぼす影響

组织处理机（密封自动固定包埋装置）中化学溶液对核酸质量的影响

基本信息

批准号：
22K15411
负责人：
丸川活司
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Health Sciences University of Hokkaido
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15411/
关键词：
FFPE組織における核酸品質管理

项目摘要

北海道内の病理検査実施施設である55施設を対象とし、FFPE組織作製工程時に用いられる組織プロセッサー機器の運用方法について実態調査を行った結果、回収率は65％で36施設から回答が得られた。組織プロセッサー機器内で脱水剤として使用されている薬液は、脱脂効果があるエタノールが32施設（89％）で、組織への浸透速度が速いメタノールを使用している施設が4施設（11％）であった。また、脱アルコール・パラフィン置換剤の薬液には、パラフィンとの親和性が強いキシレンを使用している施設が33施設（91％）と大多数で、組織への浸透速度が速いクロロホルムを使用している施設は1施設（3％）であった。ヒト大腸癌細胞株（CACO-2）を用いてアルギン酸ナトリウム法でセルブロックを作製し、北海道大学病院病理部で日常業務に使用している組織プロセッサー（Tissue-Tek VIP5Jr）内の脱水剤であるエタノール槽の中でも最も混濁した薬液を用いてFFPE組織ブロックを作製し、核酸品質について検討を行った。未使用エタノールを使用した群と汚染されたエタノールを使用した群のt検定で、p値は0.074と統計学的な有意差は認められなかったが、未使用エタノールのDIN値平均が3.7、汚染エタノールのDIN値平均が2.9と汚染エタノールで作製されたFFPE組織の核酸品質に低下傾向が認められた。組織プロセッサーに用いる脱水剤や脱アルコール・パラフィン置換剤の薬液使用量が多いため、ランニングコストからも、使用後毎回薬液をすべて交換している施設は殆どなく、薬液の交換頻度やタイミングに関しても明確な基準がない。脱水剤の汚染がFFPE組織の核酸品質低下に影響する可能性を考えると、日常業務で用いる組織プロセッサー内の薬液の種類や浸漬時間、交換頻度等に関する精度管理方法について標準化を進めていかなければならないと考えられた。

Pathological investigation in Hokkaido was carried out in 55 cases. FFPE organization was used in the organization of the project. The application method of the machine was used in the investigation. The results and recovery rate were 65% and 36 cases were obtained. In the tissue machine, the dehydration rate and the use rate of the solvent and the degreasing effect were 32 applications (89%) and 4 applications (11%) respectively. 33 applications (91%) were used for the affinity of the replacement agent, and 1 application (3%) was used for the penetration rate of the tissue. Colorectal cancer cell line (CACO-2) was prepared by using FFPE as the most turbid solution in the tissue preparation tank used in the Department of Pathology, Hokkaido University Hospital, and nucleic acid quality was evaluated. The average DIN value of unused samples was 3.7. The average DIN value of unused samples was 2.9. The average DIN value of contaminated samples was 0.074. The amount of liquid used in the preparation of dehydration, dehydration, and replacement agents shall be increased, and the amount of liquid used shall be increased, and the frequency of liquid exchange shall be increased. The possibility that contamination by dehydrating agents may affect the low quality of nucleic acids in FFPE tissues is considered, and the accuracy management methods related to the types of pharmaceutical solutions used in daily business, impregnation time, exchange frequency, etc. in the organization's facilities are required to be standardized.