骨格筋組織維持における毛細血管幹細胞の多分化能を規定するNinjrun1の役割

Ninjrun1 在骨骼肌组织维持中调节毛细血管干细胞多能性的作用

• 批准号: 22K15723
• 负责人: 鹿野 耕平
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15723/
• 关键词: 骨格筋再生; 毛細血管周細胞; Ninjrin1; サルコペニア; 神経再生

研究目標；CapSCを含むPCのNinj1が骨格筋組織の再生・維持における役割を明らかにする。Ｎｉｎｊ１欠損マウスモデルの作成；PCsに発現しているNinj1をTamoxifen処理により特異的にノックアウト誘導するマウス(NG2-CreER/Ninj-Floxp)を用いた。対照マウスとして、NG2-CreERマウスにTamoxifen処理を施した群とTamoxifen処理を行わない群を用いた。Tamoxifen処置後に下腿腓腹筋およびヒラメ筋の筋挫滅を施行した。筋挫滅モデルマウスの作成と筋再生の評価： 上記で準備したマウスの下腿筋にCardiotoxinを用いて筋挫滅モデルを作成する。各グループは４匹のオスマウスを使用した。筋挫滅後;4週間後に骨格筋組織を摘出し、組織学的評価を行った。組織学的評価はHE染色及び蛍光免疫染色（dystrophin染色）を行った。画像解析はImageJ Fijiによる骨格筋短軸像での骨格筋繊維の面積計測を行った。結果；腓腹筋の短軸切片のHE染色をNinj1 KO群と対照群で比較したところ、Ninj1 KO群で筋線維面積が有意に減少しており、ヒストグラムでは小形成筋線維が増加した。結論；周細胞特異的Ninj1ノックアウトマウスにおいて骨格筋障害後の筋線維径の低下からNinj1が骨格筋再生に寄与する可能性が示唆された。これらの結果から周細胞からの筋繊維への分化へ過程、周細胞による血管再生への過程、周細胞から神経分化し神経再生への過程による多面的な骨格筋再生過程を想定し、これらの仮説を踏まえさらに周細胞による骨格筋再生においてNinj1との関係性について詳細に評価していく。

研究目标：确定NINJ1在PC中的作用，包括CAPSC，在骨骼肌组织的再生和维持中。创建NINJ1缺陷小鼠模型：使用他莫昔芬处理中PC表达的ninj1的小鼠（NG2-CREER/NINJ-FLOXP）。作为对照小鼠，用他莫昔芬和非氨昔芬治疗治疗NG2-筛子小鼠。他莫昔芬治疗后，进行下条腿和比目鱼肌的肌肉压伤。创建肌肉抽搐模型小鼠并评估肌肉再生：在上面准备的小鼠的下腿肌肉上使用心脏毒素创建肌肉抽搐模型。每组使用四只雄性小鼠。肌肉崩溃后； 4周后，去除骨骼肌组织并通过组织学评估。通过染色和荧光免疫染色（肌营养不良蛋白染色）进行组织学评估。为了进行图像分析，使用ImageJ Fiji在骨骼肌的短轴图像上测量骨骼肌纤维的区域。结果：当他比较了NINJ1 KO组和对照组之间对胃肌的短轴切片的染色时，NINJ1 KO组的肌纤维面积显着降低，直方图显示次要肌肉纤维的增加。结论：周细胞特异性ninj1敲除小鼠骨骼肌损伤后肌肉纤维直径的减少表明，NINJ1可能有助于骨骼肌再生。基于这些结果，我们假设通过周围的周细胞分化为肌肉纤维的过程，周围的血运重建过程以及通过神经分化和神经再生的多方面骨骼肌再生过程。基于这些假设，我们将进一步评估周细胞骨骼肌再生中与忍者的关系。