Pathogenesis of lymphangiomatosis relatedsignaling pathway and microenvironment

リンパ管腫症の病変では、紡錘形の異常な細胞の増殖をきたし、それらの組織ではNRASQ61Rのモザイク体細胞変異を認めていることが知られている。この病変を再現するために、リンパ管内皮細胞（cHDLEC）にNRASQ61R遺伝子変異をレンチウイルスベクターを用いて導入し、変異細胞を作製することに成功した。また、正常細胞と変異細胞を混ぜ合わせてモザイク体細胞変異を再現した集団を作成、各種実験を行った。変異細胞は、Tube formation assayにおいて、正常とは異なる増殖形態を示した。モザイク体細胞変異を再現した集団は変異細胞の割合が多くなるほど、異常な形態を増し、病変が再現されていると考えられた。これらについて、mTOR経路、RAS/MEK経路に関連するタンパク合成の分析、メタボローム解析、血管新生に関わるサイトカインの定量などを行い、リンパ管腫症の病変で何が起こっているのかを考察した。NRAS Q61R変異細胞は、正常細胞と比べてRAS経路の蛋白合成の低下、増殖因子の分泌の増加、リンパ管新生に関わるサイトカインであるAngiopoietin-2の上昇など様々な特徴がみられ、これらがリンパ管腫症の病変の形成にかかわっている可能性があると考えられた。mTOR阻害薬、MEK阻害薬の効果についても検証し、これらは細胞増殖を抑えるのみならず、リンパ管の形態や構築の改善を認めることがin vitroで示された。上記の内容は、第18回日本血管腫血管奇形学会学術集会（2022.9.16、千葉）で発表し、最優秀演題賞と若手優秀演題賞を受賞したほか、第3回シロリムス新作用研究会（JASMIN研究会、2022.10.1、東京）、第287回日本小児科学会東海地方会（2023.2.5、名古屋）で発表し、研究奨励賞、最優秀演題賞を受賞した。論文を作成し、現在投稿中である。

リンパ管腫症の病変では、紡錘形の異常な細胞の増殖をきたし、それらの組織ではNRASQ61Rのモザイク体細胞変異を認めていることが知られている。この病変を再現するために、リンパ管内皮細胞（cHDLEC）にNRASQ61R遺伝子変異をレンチウイルスベクターを用いて導入し、変異細胞を作製することに成功した。また、正常細胞と変異細胞を混ぜ合わせてモザイク体細胞変異を再現した集団を作成、各種実験を行った。変異細胞は、Tube formation assayにおいて、正常とは異なる増殖形態を示した。モザイク体細胞変異を再現した集団は変異細胞の割合が多くなるほど、異常な形態を増し、病変が再現されていると考えられた。これらについて、mTOR経路、RAS/MEK経路に関連するタンパク合成の分析、メタボローム解析、血管新生に関わるサイトカインの定量などを行い、リンパ管腫症の病変で何が起こっているのかを考察した。NRAS Q61R変異細胞は、正常細胞と比べてRAS経路の蛋白合成の低下、増殖因子の分泌の増加、リンパ管新生に関わるサイトカインであるAngiopoietin-2の上昇など様々な特徴がみられ、これらがリンパ管腫症の病変の形成にかかわっている可能性があると考えられた。mTOR阻害薬、MEK阻害薬の効果についても検証し、これらは細胞増殖を抑えるのみならず、リンパ管の形態や構築の改善を認めることがin vitroで示された。上記の内容は、第18回日本血管腫血管奇形学会学術集会（2022.9.16、千葉）で発表し、最優秀演題賞と若手優秀演題賞を受賞したほか、第3回シロリムス新作用研究会（JASMIN研究会、2022.10.1、東京）、第287回日本小児科学会東海地方会（2023.2.5、名古屋）で発表し、研究奨励賞、最優秀演題賞を受賞した。論文を作成し、現在投稿中である。