胆汁性硬化性胆管炎における制御性T細胞を介した病態制御機構の解明と治療方法の確立

调节性T细胞介导的胆汁性硬化性胆管炎病理控制机制的阐明及治疗方法的建立

基本信息

批准号：
22K16036
负责人：
木村成宏
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究ではMSC投与によりPSCモデルマウスにおいて、PSCの病勢に効果的なTreg細胞の上昇を捉え、その免疫、生化学的な特徴を明らかにし、人PSC患者においても同様な治療効果があるか検討したい。本年の研究はまず、胆管障害における間葉系幹細胞（MSC)の影響を解析するために、胆管障害マウスモデルを作成した。胆管障害モデルには0.1%DDC添加食(DDC diet)を給餌し、7日間の投与を行った。DDC　Dietにより十分な胆管障害が起きていることを体重減少、採血での肝逸脱酵素上昇および免疫染色でのCK19陽性細胞数の増加で確認した。DDC diet開始時にIL-2を投与することで制御性T細胞を増加させたが、体重減少、肝逸脱酵素、CK19陽性細胞の改善は認めなかった。MSC投与群においても、体重の減少比率や採血結果は有意差を認めなかったため、胆管障害時のIL-2、MSC投与効果は低いと考えた。つづいてMSCの胆管再生への影響を検討するために、5日間のDDC diet投与後3日間のNormal diet期間を設ける胆管再生モデルを作成した。Normal dietへの食事変更時にMSC投与、非投与群を分けることで胆管再生へのMSCの影響を解析した。Normal dietへ変更後2日後にMSC投与群では有意差を持って体重の増加が認められ、MSCの治療効果が示唆された。3日目に肝臓を摘出し、肝臓内のリンパ球をFlow cytometolyで解析すると、コントロール群に比べて制御性T細胞のうち、Jagged1やHeliosといった因子の上昇を認め、またCD206陽性のM2マクロファージの増加を認めた。MSC投与により肝臓内の免疫細胞が変化し、胆管再生を促進されたと考えた。

在这项研究中，我们将通过MSC的给药来检测PSC模型小鼠中对PSC疾病有效的Treg细胞的升高，阐明这些细胞的免疫和生化特征，并研究人类PSC患者是否也可以使用相同的治疗效果。今年的研究首先创建了胆管疾病的小鼠模型，以分析间充质干细胞（MSC）对胆管疾病的影响。将胆管疾病模型喂食0.1％DDC饮食（DDC饮食），并施用7天。 DDC饮食引起了足够的胆管疾病，这一事实通过体重减轻，血液收集中肝脏缺乏酶增加以及免疫染色中CK19阳性细胞的增加证实。 IL-2在DDC饮食开始时进行了施用，但没有观察到体重减轻，肝缺乏酶或CK19阳性细胞的改善。在MSC组中，观察到体重减轻率或血液收集结果没有显着差异，我们认为在胆管疾病期间IL-2和MSC给药的有效性很低。接下来，为了研究MSC对胆管再生的影响，创建了胆管再生模型，在服用5天DDC饮食后三天的正常饮食期间。当饮食变化对正常饮食变化时，通过分离MSC管理和非管理组来分析MSC对胆管再生的影响。改变正常饮食后两天，在MSC组中观察到体重显着差异，这表明MSC的治疗作用。在第三天，去除肝脏，并使用流式细胞计分析肝脏中的淋巴细胞，并在对照组中观察到调节T细胞的数量增加，例如JAGGED1和HELIOS，并观察到CD206阳性M2巨噬细胞的增加。据认为，MSC给药改变了肝脏中的免疫细胞，促进了胆管再生。