急性骨髄性白血病細胞の増殖におけるラミニンーインテグリンーカドヘリン系の関与

层粘连蛋白-整合素-钙粘蛋白系统参与急性髓系白血病细胞增殖

基本信息

批准号：
22K16296
负责人：
小林宣彦
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2027-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16296/
关键词：
急性骨髄性白血病接着分子白血病顆粒球肉腫細胞間質

项目摘要

今年度の研究実績報告であるが、まず研究計画においてITGA7, CDH23を発現している細胞株を検証するため、それぞれqPCRでの遺伝子発現、フローサイトメトリーでの蛋白発現解析を試みている。インテグリンα7については、HL60、PL-21、THP1を始めとした急性骨髄性白血病細胞株と、造血器腫瘍である多発性骨髄腫の細胞株での発現をまずPCRで検証した。既存のデータと比較し、Pl21での発現は同様の傾向であったが、Hl60,THP1では異なった傾向があったため再評価を検討している。また多発性骨髄腫ではKMS12PE、MOSTI-1で発現がやや高い傾向にあった。フローサイトメトリーでの細胞表面の蛋白発現については、PL21でも発現が確認できなかったため検査試薬の再考を行っている。CDH23はsplice variantによるisoformが11種類報告されている。これまでの知見ではRNAシーケンスでの発現量の評価を行ったため、どのようなvariantが検出されるか明らかでなかった。複数のPCR primerを用い、急性骨髄性白血病と多発性骨髄腫細胞株でのCDH23発現解析とそのvariantの評価を試みた。結果的にはHL60、THP1において複数のvariantが検出された。また急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫細胞株ではvariant 7が多く検出されることがわかった。これらの結果を受け患者検体においてどのprimerで発現解析を行うか検討している。

今年的研究结果报告是，为了验证研究计划中表达ITGA7和CDH23的细胞系，我们试图分别通过qPCR分析基因表达，并分别通过流式细胞仪来分析蛋白质表达。对于整联蛋白α7，首先通过PCR验证了急性髓细胞性白血病细胞系中的表达，包括HL60，PL-21和THP1以及多发性骨髓瘤的细胞系（一种造血肿瘤）。与现有数据相比，PL21的表达相似，但是HL60和THP1的趋势不同，因此我们正在考虑重新评估。此外，在KMS12PE和MOSTI-1中，多发性骨髓瘤的表达更高。至于通过流式细胞仪的细胞表面蛋白表达，即使使用PL21也无法确认表达，我们已经重新考虑了测试试剂。 CDH23有11种类型的同工型。已经进行了先前的发现以评估RNA序列中的表达水平，因此尚不清楚将检测到哪些变体。使用多个PCR引物，我们试图分析急性髓细胞性白血病和多发性骨髓瘤细胞系中的CDH23表达并评估变体。结果，在HL60和THP1中检测到了多种变体。还发现在急性髓样白血病和多发性骨髓瘤细胞系中检测到了变体7。基于这些结果，我们正在考虑在患者标本中执行表达分析的哪些底漆。