Elucidation of mechanisms for involvement of cellular senescence in the pathogenesis of RA-ILD

阐明细胞衰老参与 RA-ILD 发病机制的机制

• 批准号: 22K16366
• 负责人: 渡邉 萌理
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16366/
• 关键词: 細胞老化; senolytics; 間質性肺炎; 関節リウマチ; Senolytics; SKGマウス

p21免疫染色を行う事により、SKGマウスにおける間質性肺炎(SKG-ILD)の肺線維化部位には、zymosan投与4週後からp21を発現する細胞を認め、線維化の進行と共にp21陽性細胞が増加する事がわかった。RT-qPCRにおいてもp21をコードするCdkn1aの有意な上昇を認め、SKG-ILDの病態に細胞老化が関連する事が示唆された。また、senolyticsとして当初検討していたbis-2-(5-phenyl-acetamido-1,3,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide (BPTES)を腹腔内投与し、BPTESがILDの発症を抑制する事ができるか検討を行った。しかし、BPTESを投与した群とコントロールとしてDMSOを投与した群を比較して、SKG-ILDの発現に有意な差を認めなかった。SenolyticsをDasatinibとQuercetinの混合(D+Q)を2週間に1回、3日間連続して内服する方法に変更し、コントロール群と比較したところ、D+Qを投与した群はRT-qPCRでp21をコードするCdkn1aと、I型コラーゲンをコードするCol1a1の発現が有意な低下を認め、老化細胞が除去されることにより、線維化が抑制されている可能性が示唆された。また、肺組織にMasson trichrome染色をを行い、Ashcroft法による肺線維化の評価を行った。D+Q群はコントロール群と比較して、有意差はつかなかったが線維化が抑制されている傾向にあった。また、D+Qの投与により、どのような免疫細胞が変化するかフローサイトメトリーで解析を行ったところ、CD45陽性細胞においてD+Q群はコントロール群より有意な低下をみせた。

通过执行P21免疫染色，在SKG小鼠的肺纤维化肺炎（SKG-ILD）的肺纤维化部位发现了表达P21的细胞，从Zymosan施用后的4周开始，P21阳性细胞随着纤维化的进展而增加。 RT-QPCR也显示出编码P21的CDKN1A显着增加，这表明细胞衰老与SKG-ILD的病理有关。此外，BIS-2-（5-苯基 - 乙酰基-1,3,4-噻二唑-2-基）硫化物（BPTES）最初被塞溶术视为，腹膜内术语以确定BPTES是否可以抑制ILD的发作。但是，在比较接收BPTE的组和接收DMSO作为对照组时，在SKG-ild的表达中未观察到显着差异。 Senolytics was changed to a method in which a mixed Dasatinib and Quercetin (D+Q) was taken once every two weeks for three consecutive days, and compared with the control group, and when the group receiving D+Q was administered, there was a significant decrease in the expression of Cdkn1a, which encodes p21 and Col1a1, which encodes type I collagen, by RT-qPCR, suggesting that fibrosis may be suppressed通过去除衰老细胞。此外，在肺组织上进行了Masson三色染色，并使用Ashcroft方法评估了肺纤维化。尽管与对照组相比，D+Q组没有显着差异，但纤维化往往会被抑制。此外，当通过流式细胞仪进行D+Q的施用以确定哪种免疫细胞发生变化时，D+Q组的CD45阳性细胞显示出明显的降低，而不是对照组。

项目成果

モデルマウスを用いた関節リウマチに併発する間質性肺炎に関与する細胞老化機構の解明

使用模型小鼠阐明与类风湿性关节炎相关的间质性肺炎相关的细胞衰老机制

• 发表时间: 2023
• 作者: Origuchi Tomoki;Umeda Masataka;Koga Tomohiro;Kawashiri Shin-ya;Iwamoto Naoki;Ichinose Kunihiro;Tamai Mami;Tsukada Toshiaki;Miyashita Taiichiro;Iwanaga Nozomi;Horai Yoshiro;Arima Kazuhiko;Aramaki Toshiyuki;Ueki Yukitaka;Eguchi Katsumi;Kawakami Atsushi;渡邉 萌理
• 通讯作者: 渡邉 萌理