CD8+T細胞の分化における転写因子FoxO1の制御メカニズムの解明を目指して

点击翻译按钮获取中文摘要

1型糖尿病は、膵島炎を病理学的特徴とする自己免疫疾患で、CD8+T細胞は膵島炎をおこした膵島で最も多く認める炎症細胞である。T細胞が分化するときに、複数の転写因子が協調して働くが、転写因子FoxO1は主要なものとして知られている。研究代表者はFoxO1阻害薬で前処置したCD8+T細胞を刺激すると対照群と比較してIFNgの産生と分泌が減少することを確認している。当該年度は、CD8+T細胞におけるFoxO1が制御する遺伝子を明らかにするために、2種類のFoxO1阻害薬を用いて、自然発症1型糖尿病モデル（NOD）マウスの脾臓から単離したCD8+T細胞へ添加をおこない、抗CD3/CD28抗体で刺激後24時間で細胞を回収して、RNA-seq解析を実施した。発現の変動が大きな上位100遺伝子を抽出したところ、ゲノムワイド関連解析（GWAS）により、1型糖尿病との関連が報告されている遺伝子が8個含まれていることが明らかとなった。加えて、NODマウスの糖尿病発症および進展抑制の検証を試みた。NODマウス（メス）は通常70-80％で糖尿病を発症するとされるが、当該年度の検討では、30週齢までの累積発症率が想定よりも非常に低いことが明らかとなった。最後に、FoxO1阻害薬によるミトコンドリア機能への影響を探索するために、細胞外フラックスアナライザーを用いた検討を開始した。細胞数や試薬の濃度を検討し、現在、最適な実験条件が明らかとなりつつある。