クッシング病におけるUSP48遺伝子変異の実態ならびに新規治療機序の解明

阐明USP48基因突变现状及库欣病新治疗机制

• 批准号: 22K16410
• 负责人: 柿沢 圭亮
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16410/
• 关键词: クッシング病; USP48遺伝子

本研究の目的は、(1) 日本人のクッシング病患者における、USP48遺伝子の体細胞変異率を示すこと、(2) USP48遺伝子変異とCK2を介した細胞増殖関連シグナル伝達経路との関連性を解明し、その関連タンパク質の変化をUSP48遺伝子変異陽性クッシング病腫瘍検体における免疫染色にて示すことである。これにより、本邦のクッシング病症例における遺伝子変異の実態ならびに新規治療機序の解明を目指している。当該年度は、まず上記(1)の研究に着手した。手術により摘出されたクッシング病の腫瘍検体(FFPE組織切片)より、DNAの抽出を行なった。抽出したDNAを用いて、USP8遺伝子変異陰性の腫瘍検体に関して、USP48遺伝子変異の有無を確認した。USP48遺伝子はp.M415Iまたはp.M415Vが変異のホットスポットであることが既知であり、同部位を標的としてサンガーシークエンスでの解析を行なった。これまでに、計35検体の解析を行ない、内2検体(5.7%)でUSP48遺伝子変異を認めた。変異部位はともに既知のp.M415Iであった。次に上記(2)の研究に着手した。AtT20細胞株を用いた検討を予定しており、同細胞へトランスフェクションするため、先ずは遺伝子変異を含む合成USP48DNAの作成を行なった。既知のp.M415I(c.1245G>C, c1245G>Aの2種), p.M415V(c.1243A>G)の遺伝子変異を含む、合成USP48DNAの作成に成功した。

The purpose of this study is: (1) The Japanese patient with のクッシング disease and the somatic cell mutation rate of the USP48 gene are shown; (2) The USP48 gene is related to CK2 and is related to cell proliferation. The correlation is not clear and the correlation is not clear. The immunostaining of USP48 heterogeneous positive subtypes of diseased tumors and lesions was performed.これにより, Honbuni's のクッシング Disease Case における 伝子変different の実state ならびにNew Regulations Treatment Machine Sequence の Explain を Eyes Refer to している. In that year, the research on (1) mentioned above was started. During the surgery, the diseased tumor was extracted (FFPE tissue section), and the DNA was extracted. The DNA was extracted and confirmed using the test, USP8 was used to confirm the presence or absence of abnormality in USP8 and USP8 was negative. USP48弝子はp.M415Iまたはp.M415Vが変differentのホットスポットであThe ることが known であり, the same part as the としてサンガーシークエンスでのanalytic を行なった.これまでに, the analysis of the 35 検体の行ない, and the inner 2 検体 (5.7%) are the USP48 缝子変different を知めた. The different parts are already known. M415I is the same. The research on the second chapter (2) was started. The AtT20 cell line has been used for the first time, and the same cell line has been used for the same cell line.ンするため, first ずは缝子変変を与む, USP48DNA was synthesized and made を行なった. Two species of p.M415I (c.1245G>C, c1245G>A) and p.M415V (c.1243A>G) are known, and the synthesis of USP48DNA has been successful.